干细胞研究进展讲稿VIP免费

干细胞研究进展组胚：郭雨霁到底干细胞是什么东西，为何会受到如此的关注？干细胞是潜力无穷？还是被我们过度期待？干细胞（stemcells）是一类能够进行自我更新（self-renew）和尚未分化（un-differentiated具有分化潜能）的细胞；可以分化为多种组成人体的组织或器官的细胞类型。自然存在的各种干细胞多能(pluripotent)干细胞(胚胎干细胞、胚胎生殖细胞)单能(unipotent)干细胞(成体干细胞)造血干细胞其他组织特异性干细胞（神经、肺部干细胞等）特化细胞红细胞血小板白细胞全能(totipotent)干细胞(受精卵)Thefertilizedovumistheoriginofthelife.滋养层胎盘及胎儿的附属结构卵黄囊尾侧壁上的内胚层细胞是原始生殖细胞的发源地。后经肠系膜迁移至生殖腺嵴。横向分化：通常情况下，供体的干细胞在受体中分化为与其组织来源一致的细胞。部分干细胞在特定条件下可以转化为其它胚层来源的细胞，如肌肉干细胞在特定条件下可以分化为各种血细胞等。1999年Goodell等人分离出小鼠的肌肉干细胞，体外培养5天后，与少量的骨髓间质细胞一起移植入接受致死量辐射的小鼠中，结果发现肌肉干细胞会分化为各种血细胞。干细胞是一类能够进行自我更新和具有分化潜能的细胞（具有分裂增殖能力，干细胞本身不是处于分化途径的终端）。干细胞通过两种方式生长*对称分裂---形成两个相同的干细胞*不对称分裂---由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配，使得一个子细胞不可逆的走向分化的终端成为功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍作为干细胞保留下来。干细胞增殖的缓慢性干细胞增殖的自稳性区别于肿瘤细胞的本质性特征。有利于其对特定的外界信号做出反应，以决定是进入增殖还是进入分化程序，同时有利于减少干细胞内基因突变的危险。第2周第3周ESC的体外培养建系定向诱导分化在生物医学上的应用从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC子宫从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC原代鼠胚成纤维细胞（primarymouseembryonicfibroblast，PMEF）以其易于取材、分化抑制效果好等特点而被广泛应用。目前常用的饲养层有：STO（SIM小鼠成纤维细胞株，并为抗硫代鸟嘌呤6-thioguanine和鸟本箭毒素甙鸟巴因oualiain选择过的细胞）、PMEF(原代培养鼠胚成纤维细胞)、SNL(G418R基因和LIF基因转染的STO）、HBC-5637等。随着对人ESC研究的深入，来源于人ESC的组织器官可望用于临床。在体外培养人ESC时多使用PMEF作为饲养层，这样在ESC用于临床治疗时，可能带来鼠源性蛋白的污染而引起不良反应，所以有人尝试利用人胚胎成纤维细胞作饲养层进行人ESC的培养，并已有成功的报道。饲养层细胞的抑分化功能来源于基质中的白血病抑制因子（leukemiainhibitingfactor,LIF），LIF最早于1988年在小鼠KrebsⅡ腹水瘤细胞条件培养基中被纯化的，是一种典型的多功能细胞因子。如：抑制骨髓白血病m1细胞的增殖，诱导其向巨噬细胞方向分化；促进外周胆碱能神经分化和功能成熟；刺激破骨细胞增殖；调节肝细胞急性期反应蛋白的合成；抑制多能胚胎干细胞的分化等。有学者向ESC培养基中加入LIF以取代饲养层细胞，辅以条件培养基即可维持ESC的多能性，从而消除饲养层细胞的干扰。从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC从小鼠囊胚的内细胞群中分离培养ESC嵌合体动物的制备方法主要有三种：融合法、显微注射法和共培养法。融合法是指将来源于不同品系动物的早胚消化去透明带后，在融合剂（多用植物血球凝集素）的作用下，形成融合胚。实验过程中，由于消化剂、融合剂的使用，会对胚胎造成不同程度的损伤，所以融合法制备嵌合胚的成功率较低。共培养法是将着床前的早期胚胎与ESC进行共培养而获得嵌合胚的一种方法。虽然有资料表明，粘附在早期胚胎滋养层外面的ESC，经过过夜培养，能有效的与宿主ICM细胞整合，但是在共培养过程中，很难控制发生整合的ESC的数目，因此也限制了其使用。显微注射法应用最为广泛。通过显微注射法构建嵌合体是一项复杂的技术，ESC本身的特性、受体胚胎的品系来源以及...