巨噬细胞吞噬现象的观察巨噬细胞吞噬现象的观察•实验目的实验目的•实验原理实验原理•仪器、材料与试剂仪器、材料与试剂•实验步骤实验步骤•实验报告及思考题实验报告及思考题目的要求目的要求1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程实验原理实验原理在高等动物中，单核吞噬细胞系统和嗜中性粒细胞在高等动物中，单核吞噬细胞系统和嗜中性粒细胞专司吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。专司吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。单核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定和游走的单核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定和游走的巨噬细胞。巨噬细胞。但静息的巨噬细胞其分泌和杀伤功能低下，受到病原微但静息的巨噬细胞其分泌和杀伤功能低下，受到病原微生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态，生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态，分泌能力得以增强，但杀伤功能仍然很低。只有活化的巨噬分泌能力得以增强，但杀伤功能仍然很低。只有活化的巨噬细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作用。用。大大吞吞噬噬细细胞胞来源：单核巨噬细胞存在部位：血液（单核细胞)全身结缔组织及小血管的基底膜组织（巨噬细胞）功能：吞噬病原微生物（寄生虫等），死亡细胞。小小吞吞噬噬细细胞胞来源：中性粒细胞存在部位：血液、炎症部位（全身）功能：主要吞噬化脓菌三、实验用品三、实验用品•11．器材．器材•显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸注射器、吸管、吸水纸•22．试剂．试剂•生理盐水、生理盐水、AlseverAlsever溶液、瑞士染液溶液、瑞士染液•33．材料．材料•小白鼠、小白鼠、1%1%鸡血红细胞。鸡血红细胞。四、实验步骤四、实验步骤•实验前实验前33天取小白鼠腹腔注射天取小白鼠腹腔注射66％淀粉液％淀粉液11毫升毫升（连续注射三天效果较好）。（连续注射三天效果较好）。•11．小鼠腹腔注射．小鼠腹腔注射11％的鸡红细胞悬液％的鸡红细胞悬液2ml2ml，，轻揉腹部使鸡细胞分散。轻揉腹部使鸡细胞分散。•22．．2525～～3030分钟后，用颈椎脱臼法处死分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。并腹腔注射生理盐水小鼠。并腹腔注射生理盐水22毫升毫升3.3.在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹腔液，静置其中滴加一滴腹腔液，静置1010分钟，腹腔分钟，腹腔巨噬细胞贴壁，弃去生理盐水，待其巨噬细胞贴壁，弃去生理盐水，待其标本标本稍干后稍干后瑞氏染液染色瑞氏染液染色。。•4.4.瑞氏染色瑞氏染色：：滴加滴加3~43~4滴瑞氏染液于标本上，以滴瑞氏染液于标本上，以完全盖住标本为宜。完全盖住标本为宜。•55分钟分钟后甩去玻片上的染液，自来水轻洗，吸水纸后甩去玻片上的染液，自来水轻洗，吸水纸吸干。吸干。•干燥后油镜镜检干燥后油镜镜检•5.5.清洗油镜，解剖盘及器具，打扫桌面卫生、实清洗油镜，解剖盘及器具，打扫桌面卫生、实验室卫生，老鼠尸体要掩埋！验室卫生，老鼠尸体要掩埋！实验报告及思考题实验报告及思考题实验报告实验报告1.1.画图示出你所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬羊红细胞的各种形态。画图示出你所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬羊红细胞的各种形态。2.2.计算吞噬百分比，即每一百个吞噬细胞中吞有羊红细胞的吞噬细胞数。计算吞噬百分比，即每一百个吞噬细胞中吞有羊红细胞的吞噬细胞数。思考题思考题1.1.在高等动物中哪些细胞具有吞噬功能？在高等动物中哪些细胞具有吞噬功能？2.2.在什么情况下巨噬细胞吞噬功能加强？在什么情况下巨噬细胞吞噬功能加强？未被吞噬的鸡红细胞吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞
