课题课题22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数专题专题22微生物的培养与应用微生物的培养与应用一、课题背景一、课题背景11、、尿素的利用尿素的利用尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥农业氮肥。尿素。尿素不能直接不能直接被农作物被农作物吸收吸收。土壤中的细菌将尿素。土壤中的细菌将尿素分解成氨分解成氨之之后才能被植物利用。后才能被植物利用。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶能合成脲酶CO(NHCO(NH22))22脲酶脲酶+H+H22OO+CO+CO222NH2NH3333、常见的分解尿素的微生物、常见的分解尿素的微生物((异养需氧异养需氧型型))芽孢杆菌芽孢杆菌、小、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌。某些真菌和放线菌。硝化细菌、固氮菌、根瘤菌：硝化细菌固氮菌根瘤菌代谢方式自养需氧型异养需氧型异养需氧型能量来源NH3有机物豆科植物的有机物转换过程将NH3转变成NO2-、NO3-固氮酶催化机理总反应式为：N2+8e-+8H++16Mg·ATP+16H2O→2NH3+H2+16Mg·ADP+16Pi在固氮酶的作用下，根瘤中的菌体将分子态氮转化为氨态氮（同左）44、课题目的、课题目的①①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一一..研究思路研究思路㈠㈠..筛选菌株筛选菌株㈡㈡..统计菌落数目统计菌落数目㈢㈢..设置对照设置对照11、实例：、实例：启示：启示：寻找寻找目的菌种目的菌种时要根据它对时要根据它对生存环境生存环境的的要求，到相应的环境中去寻找。要求，到相应的环境中去寻找。原因：原因：因为热泉温度因为热泉温度7070～～808000CC，淘汰了绝，淘汰了绝大多数微生物只有大多数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。DNADNA多聚酶链式反应多聚酶链式反应是是一种在体外将一种在体外将少量少量DNADNA大量复制大量复制的技术，此项的技术，此项技术要求使用技术要求使用耐高温耐高温（（939300CC）的）的DNADNA聚合聚合酶酶。。22、实验室中微生物的筛选原理：、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件人为提供有利于目的菌株生长的条件((包括营养、温度、包括营养、温度、pHpH等等))，同时抑，同时抑制或阻止其他微生物生长。制或阻止其他微生物生长。15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：①①从物理性质看此培养基属于哪类？从功能上从物理性质看此培养基属于哪类？从功能上属于哪类培养基？属于哪类培养基？固体培养基固体培养基②②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：碳源：葡萄糖、尿素葡萄糖、尿素氮源：氮源：尿素尿素选择培养基选择培养基唯一氮源唯一氮源〖思考2〗该培养基对微生物（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是。具有只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长培养基的培养基的氮源为尿素氮源为尿素，只有能合成，只有能合成脲酶脲酶的微生物的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长繁生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长繁殖，而受到抑制，所以用此殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出培养基就能够选择出分解尿素的微生物分解尿素的微生物。。44、培养基选择分解尿素的微生物的原理、培养基选择分解尿素的微生物的原理选择培养基：选择培养基：在微生物学中，将允许在微生物学中，将允许特定特定种类的微生物生长种类的微生物生长，同时，同时抑制或阻止其他种类抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基微生物生长的培养基。。※※几种...
