动物源性食品中磺胺类药物残留量LC-MSMS分析方法VIP免费

51一、背景磺胺类药物（Sulfonamides，SAs）是指一类具有对氨基苯磺酰胺结构、用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学药物，是当前畜禽生产中常用的抗菌、抗原虫药物，具有抗菌谱广、价格低、化学性质稳定、使用方便等优点。但是摄入大量磺胺类药物会破坏正常免疫机能，破坏人的造血系统，造成溶血性贫血症、粒血细胞缺乏症等症状。并且人体长期摄入含磺胺类药物的动物性食品后，药物不断在人体内蓄积，当积累到一定程度后，就会对人体产生毒性作用，同样可引起肾损害，所以针对磺胺类药物的监控是一项刻不容缓的工作。目前关于磺胺类药物的标准已出台《GB/T20759-2006畜禽肉中十六种磺胺类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、《GB/T21316-2007动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定高效液相色谱-质谱-质谱法》，方法中涉及肌肉、内脏、鱼、虾和肠衣、牛奶中磺胺脒、甲氧苄啶、磺胺醋酰、磺胺嘧啶等几十种磺胺类药物的前处理方法及液质检测方法。本文中将详细介绍采用ABSCIEXAPI4000™LC-MS/MS检测磺胺类药物分析10种磺胺类药物，并且经实验证实ABSCIEXAPI4000+™、4000QTRAP®、API5000™以及TRIPLEQUAD™5500、QTRAP®5500同样适用与该方法。二、化合物信息动物源性食品中磺胺类药物残留量LC-MS/MS分析方法表1.化合物基本信息化合物英文通用名分子量CAS分子式磺胺嘧啶Sulfadiazine250.368-35-9C10H10N4O2S磺胺吡啶Sulfapyridine249.3144-83-2C11H11N3O2S磺胺噻唑Sulfathiazole255.372-14-0C9H9N3O2S2磺胺甲基嘧啶Sulfamerazine264.3127-79-7C11H12N4O2S磺胺二甲嘧啶Sulfadimidine278.357-68-1C12H14N4O2S磺胺甲氧哒嗪Sulfamethoxypyridazine280.380-35-3C11H12N4O3S磺胺间二甲氧嘧啶Sulfadimethoxine310.3155-91-9C12H14N4O4S磺胺氯达嗪Sulfachlorpyridazine284.780-32-0C10H9ClN4O2S磺胺邻二甲氧嘧啶Sulfadoxine310.32447-57-6C12H14N4O4S磺胺甲基异恶唑sulfamethoxazole253.3723-46-6C10H11N3O3S磺胺苯吡唑Sulfaphonazole314.4526-08-9C15H14N4O2S三、前处理方法（GB/T21311-2007）3.1提取3.1.1肌肉、内脏、鱼虾和肠衣称取2g（精确至0.01g）试样置于玻璃研钵内，再称取约6g（精确至0.01g）C18填料加至试样上用玻璃杵轻轻研磨，使样品与填料混合均匀（色泽均一，状态分散），装于50mL具螺旋盖聚四氟乙烯离心管中，加入25mL乙腈-水溶液，涡旋振荡1min，放入家用微波炉中在光波模式下微波辐照30s，3000r/min离心5min，将乙腈层移入100mL棕色分液漏斗中。离心后的沉淀物再加入25mL乙腈摇匀，微波辅助提取30s，3000r/min离心5min，合并已经提取液，待净化。动物源性食品中磺胺类药物残留量LC-MS/MS分析方法523.1.2牛奶称取2g（精确至0.01g）试样置于玻璃研钵内，加入6g（精确至0.01g）硅藻土，另加入6g（精确至0.01g）C18填料，用玻璃杵轻轻研磨30s，使样品与填料混合均匀（色泽均一，状态分散），装于50mL具螺旋盖聚四氟乙烯离心管中，加入25mL乙腈-水溶液，涡旋振荡1min，放入家用微波炉中在光波模式下微波辐照30s，3000r/min离心5min，将乙腈层移入100mL棕色分液漏斗中。离心后的沉淀物再加入25mL乙腈摇匀，微波辅助提取30s，3000r/min离心5min，合并已经提取液，待净化。3.2净化提取液中加入25mL乙腈饱和正己烷溶液，振摇5min，将底层乙腈溶液移入150mL棕色鸡心瓶中，加入10mL正丙醇，用旋转蒸发仪于45℃水浴中加压蒸发至近干，氮气流吹干，准确加入1mL乙腈-水溶液，超声30s溶解残渣，将溶解液移入10mL棕色离心管中，加入0.5mL乙腈饱和正己烷，涡旋振荡2min，于3000r/min离心5min，弃去正己烷溶液，取底层乙腈-水溶液过0.22µm微孔滤膜后，供高效液相色谱-质谱/质谱测定。四、实验方法4.1液相条件色谱柱：AgilentZorbaxEclipseXDB-C18,3.0×100mm,3.5µm；柱温：40℃，流速：300µL/min；流动相：A：水（含1mM甲酸铵及0.1%甲酸），B：乙腈；梯度洗脱，洗脱条件见表2：表2.液相色谱条件时间（min）流速（µL/min）A（%）B（%）030090102.530010904.830010904.930090101030090104.2质谱条件离子源：TurboV™离子源；扫描模式：正离子；采集模式：多反应监测MRM；表3.磺胺类药物...