目录血清总胆固醇(TCHO)测定目录熟悉CHOD-PAP法(酶法)测定血清总胆固醇(TCHO或TC)的原理和方法;能够正确、独立、熟练地操作所用仪器;能够对实验结果进行合理分析。实验目的目录实验原理)胆固醇酯酶(CEH)胆固醇氧化酶(COD)过氧化物酶(PODCHE+H2OTCHO+O2H2O2+4-AAP+酚醌亚胺+H2O(Trinder反应)CHO+RCOOHΔ4-胆甾烯酮+H2O2CHOD-PAP法(酶法)是目前临床实验室测定血清TCHO的常规方法;血清中总胆固醇(TCHO、TC)是血脂检验单的指标之一;血清中总胆固醇包括游离胆固醇(FC,30%)和胆固醇酯(CE,70%)两部分,血清中胆固醇酯经胆固醇酯酶(CEH)水解后生成FC,其与原血清中已经存在的FC一起,经胆固醇氧化酶(COD)氧化,所产生的H2O2的与4-氨基安替比林(4-AAP)、酚氧化缩合成红色醌亚胺。醌亚胺在520nm处有最大吸收峰,反应产生的颜色深浅与总胆固醇含量成正比。(红色)其反应式如下:目录分光光度计;TCHO测定试剂;2ml刻度吸管;20μl微量加样器;人血清;37℃水浴箱等。实验用品目录实验过程2、按表加量加入物空白管(B)标准管(S)测定管(T)工作液2.0ml2.0ml2.0ml蒸馏水20μl--标准液-20μl-血清--20μl3、混匀,置37℃水浴10分钟,以空白管调零,λ520nm波长比色测定AT、AS值。按表加量1、标本要求:采血前24小时禁食高脂,空腹采血,并尽快分离血清防止溶血目录计算血清TCHO(mmol/L)=×5.17正常参考值2.33~5.69mmol/LSTAA目录实验结果与分析1、实验结果2、实验分析各种因素(年龄、性别、遗传因素、生活方式等)引起胆固醇代谢紊乱,使血液中胆固醇水平增高或降低。病理性胆固醇↑:见于糖尿病、动脉粥样硬化、肾病综合征、甲状腺功能减退、肝胆疾病等。高胆固醇血症与AS的发生率呈正相关。病理性胆固醇↓:见于甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病、贫血、肝硬化等。3、临床意义目录注意安全:试剂有毒!正确使用玻璃移液管和微量移液器;严格按照表规定量加入;正确使用分光光度计;手拿比色皿的‘‘毛面’’,试剂不超过比色皿容积的2/3。实验注意事项