血清总补体溶血活性测定补体是存在于血清中的一组不耐热的具有酶活性的球蛋白。补体是抗体发挥溶细胞或溶菌作用的补充条件。在正常情况下，补体含量相对稳定，但在某些疾病时可发生变化。动态监测血清总补体的活性，对一些疾病有辅助诊断的意义。概述概述实验原理绵羊红细胞（SRBC）与相应抗体结合形成的致敏红细胞可激活补体，从而导致SRBC溶解。当致敏红细胞的浓度一定时，在规定的反应时间内，溶血程度与补体的活性成正相关，但不是直线关系，为典型的S形曲线。在轻微溶血和接近完全溶血时，补体量的变化不能使溶血程度有显著改变，即溶血对补体量的变化不敏感。在半溶血（50％溶血）上下时曲线最陡，即使补体含量仅有较小变动时，溶血程度也会发生较大的改变，也就是说对补体量的变化非常敏感。故采用50％溶血作为终点指标要比100％溶血敏感的多，这一方法称为补体50％溶血试验（complementhemolysis50％assay），简称为CH50。以引起50%溶血所需的最小补体量为一个CH50单位，由此可以计算出待测血清中总的补体溶血活性，以U/ml表示。主要试剂与器材溶血素2％SRBCpH7.4巴比妥缓冲液（BBS）待测血清、蒸馏水离心机、试管、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、比色杯等实验步骤1.稀释待测血清：吸取待测血清0.2ml，加BBS3.8ml，将血清1：20稀释（已完成）。2.正式实验取10只试管，分别编号，按照下表加入各试剂试管号BBS1：20稀释血清2％SRBC2U溶血素补体溶血活性123456789101.401.351.301.251.201.151.101.051.001.500.100.150.200.250.300.350.400.450.500.000.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5置37℃水浴30min2001331008066.657.15044.440-3.制备50％溶血标准管理论方法代替方法2％SRBC0.5ml4.5mlH2O++蒸馏水2ml2％SRBC0.5ml+17g/L高渗盐水2ml+2％SRBC0.5ml以上两种方法效果相同，所以实验中采用后者。使红细胞全部溶血形成等滲50％溶血管结果判断方法将各反应管经2500r/min、5min离心后，先用目测法观察其溶血程度，并与50％溶血标准管比较，选择与标准管最接近的两管。再用分光光度计于波长542nm进行比色测定。以BBS缓冲液为空白对照，校正零点，找出吸光度与标准管最接近的一管，根据该管的血清用量，求出总补体溶血活性。总补体活性（U/ml）＝1血清用量（ml）×稀释倍数实验结果写出标准管和选出的两管的吸光度，判断哪一管与标准管的透光率接近。计算总补体活性。注意事项待测血清必须新鲜，如放置室温2h以上，可使补体活性下降。待测血清还应该无溶血、无污染等。绵羊红细胞等试剂均应新鲜配制。实验器材应该清洁，残留的酸碱等化学物质均可使补体受破坏。补体的溶血活性可受多种因素的影响，如溶液的酸碱度变化、钙和镁离子增加等可使补体溶血活性降低。应用与评价本方法快速、简便，但敏感性较低，结果易受多种因素的影响。主要用于测定补体经典激活途径的溶血功能，不能测定补体蛋白的绝对值参考值：50-100U/ml增高：可见于急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤降低：多见于免疫复合物型超敏反应
