微生物生长量的测定微生物学研究中常常要进行微生物生长量的测定,有多种方法用于微生物生长量的测定,概括起来常用的有以下几种:(一)直接计数法 ( 又称全数法 ) 1 、计数器直接测数法 取定量稀释的单细胞培养物悬液放置在血球计数板 ( 细胞个体形态较大的单细胞微生物,如酵母菌等 ) 或细菌计数板 ( 适用于细胞个体形态较小的细菌 ) 上,在显微镜下计数一定体积中的平均细胞数,换算出供测样品的细胞数
( 1 )血球计数板及细胞计数 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的
玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网
方格网上刻有 9 个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用
这一大方格的长和宽各为 1mm,深度为 0
1mm,其体积为 0
计数室通常有两种规格
一种是大方格内分为 16 中格,每一中格又分为 25 小格;另一种是大方格内分为 25 中格,每一中格又分为 16 小格
但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由 16×25=25×16=400 个小方格组成
血球计数板是一种在特定平面上划有格子的特殊载片
在划有格子的区域中,有分别用双线和单线分隔而成的方格
其中有以双线为界划成的方格 25( 或 16) 格,这种以双线为界的格子称为中格(见图 5-10 ),其内有以单线为界的 16 (或 25 )小格
因此,用于细胞计数的区域的总小格数为:25×16 = 400该 400 个小格排成一正方形的大方格,此大方格的每条边的边长为 1 mm ,故 400 个小格的总面积为 1mm 2
在进行细胞计数前,先取盖玻片盖于计数方格之上,盖玻片的下平面与刻有方格的血球计数板平面之间留有 0
1mm 高度的空隙
含有细胞的供测样品液被加注在此空隙中