第二章_抗体VIP免费

第三章抗体(Antibody)(Antibody)抗体的分子结构抗体的多样性抗体的代谢抗体产生学说的发展免役球蛋白超家族各类抗体的特性与免役生物学功能抗体与免役球蛋白在概念上的区别一、名词性质抗体-免疫学,针对某种抗原免役球蛋白-化学二、分类抗体-很多,复杂免役球蛋白-按化学性质分为IgG.IgM,IgA,IgD,IgE三、抗原有无抗体-不存在没有抗原的抗体免役球蛋白-不一定有抗原四、提取方法抗体-亲和层析免役球蛋白-用化学方法五、纯度抗体-免役纯免役球蛋白-化学纯六、定量方法抗体-免疫学(效价)免役球蛋白-化学方法(蛋白质浓度)七、特异性部位抗体-Fab（可变区）免疫球蛋白—Fc八、多样性抗体—大免疫球蛋白—小抗体与免疫球蛋白在概念上的区别项目抗体（antibody）免疫球蛋白（immunoglobulin）名词性质免疫学，针对某种抗原化学分类很多、复杂按化学性质IgG.IgM,IgA,IgD,IgE抗原有无不存在没有抗原的抗体不一定有抗原性提取方法亲和层析用化学方法纯度免疫纯化学纯定量方法免疫学（效价）化学方法（蛋白质浓度）特异性部位FabFc多样性高低一、抗体的分子结构•单体分子结构•水解片段与生物学活性•免疫球蛋白的特殊分子结构抗体（免疫球蛋白）分子的基本结构是如何确定的？•1950s－1960sRodneyPorterGeraldEdelmanAlfredNisonoff•酶水解和还原•PorterandEdelman用papain水解IgG•Nissonoff用Pepsin水解IgG•抗体与降解片段反应•抗Fab片段的抗体（可与轻链和重链结合）•抗Fc片段的抗体（只与重链结合）PapainFcFabPepsinFcPeptidesF(ab’)2•免疫球蛋白氨基酸序列的确定•多发性骨髓瘤（multiplemycloma）•骨髓瘤蛋白（myclomaprotein）•多发性骨髓瘤病人血清中的免疫球蛋白有95％是骨髓瘤蛋白；骨髓瘤细胞可以分泌大量的轻链，在骨髓瘤病人的尿中可以发现，称为Bence－Jonesprotein，动物也有多发性骨髓瘤，如小鼠的骨髓瘤细胞。•轻链的序列确定：Bence－Jonesprotein•重链的序列确定：用mercaptoethanol还原和alkylation骨髓瘤蛋白，再经层析分离获得重链。1、单体分子结构1.1、重链（heavychain，H链）•氨基酸组成：420－440aa，分子量约50KD，两条重链之间由一对或一对以上的二硫键互相连接•可变区（variableregion，VH）•恒变区（constrantregion）•高变区（hypervariableregion）－CDR•骨架区（frameworkregion）•类型（class）重链高变区的氨基酸残基位置•31－37aa•51－58aa•84－91aa•101－110aaHVR3FR1FR2FR3FR4HVR1HVR2VariabilityIndex257550100Aminoacidresidue150100500重链的类型•γ－IgG•μ－IgG•α－IgG•ε－IgG•δ－IgG•重链的类型决定免疫球蛋白（抗体）的种类1.2、轻链（lightchain，L链）•氨基酸组成：213－214aa，分子量约为25KD。两条相同的轻链其羧基端（C）靠二硫键分别与两条重链连接•可变区（variableregion，VL）•恒变区（constrantregion，CL）•高变区（hypervariableregion）•骨架区（frameworkregion）•类型（type）轻链高变区的氨基酸残基位置•26－32aa•48－55aa•90－95aaHVR3FR1FR2FR3FR4HVR1HVR2VariabilityIndex257550100Aminoacidresidue150100500轻链的类型•κ（kappa型）•λ（Lambda型）•各类免疫球蛋白都有两型轻链分子•给类免疫球蛋白的轻链都是相同的两型轻链的比较动物κλ人66％34％小鼠97％3％兔80％20％1.3免疫球蛋白的功能区（domain）•VH－VL抗体分子结合抗原的所在部位•CH1－CL遗传标记所在•CH2抗体分子的补体结合位点，与体的活化有关•CH3与抗体细胞的亲细胞性有关•铰链区（hingeregion）CH1与CH2之间，30aa；与抗体分子的结构型变化有关2、水解片段与生物学活性PapainFcFabPepsinFcPeptidesF(ab’)22.1Fab片段•组成•由一条完整的轻链和N端1/2重链组成，分子量为45KD•生物学活性•结合抗原•决定抗体分子特异性的部位2.2Fc片段•组成•由重链C端1/2组成，包含CH2和CH3两个功能区，分子量为50KD•生物学活性•1.抗体分子选择性通过胚胎•2.补体的活化•3.决定抗体分子的亲细胞性•4.抗体分子通过粘膜进入外分泌液•5.决定各类免疫球蛋白抗原特异性的部位3、免疫球蛋白的特殊分子结构3.1连接链...