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基因工程11DNA重组技术的基本工具VIP免费

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设想一能否培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢?•基因工程培育抗虫棉的简要过程:基因工程培育抗虫棉的简要过程:苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌提取提取抗虫基因抗虫基因普通棉花(无抗虫特性)棉花细胞(含抗虫基因)与运载体与运载体DNADNA拼接,导入拼接,导入棉花植株(有抗虫特性)表达表达•抗虫棉的培育有哪些关键步骤?•解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取,产量低成本高。而微生物生长迅速,容易控制。于是科学家设想,若能将人的胰岛素基因导入微生物体内,并得以表达,就不仅能解决产量问题,还能大大降低生产成本,使药品价格大幅下降。设想二能否让微生物产生出人能否让微生物产生出人的的胰岛素等珍贵药物?胰岛素等珍贵药物?DNA重组技术的基本工具§1.1DNA重组技术的基本工具专题一基因工程“分子手术刀”──限制酶“分子缝合针”──DNA连接酶“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例?那么这类生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝,它们有何保护机制?限制酶切割外源DNA,使之失效,从而达到保护自身的目的!识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是从主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。的一种酶。40004000种。种。11、来源:、来源:22、种类:、种类:33、作用:、作用:44、结果:、结果:形成两种末端形成两种末端黏性末端平末端•什么叫黏性末端?什么叫黏性末端?当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线两侧中心轴线两侧切开时切开时,,被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA两条单链两条单链的切口,带有几个的切口,带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸,他们之,他们之间正好间正好互补配对互补配对,这样的切口叫,这样的切口叫黏性末端黏性末端。。当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线处切中心轴线处切开时开时,切开的,切开的DNADNA两条单链的切口,是两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平整的,这样的切口叫平末端平末端。。GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割二、“分子缝合针”二、“分子缝合针”————DNADNA连接酶连接酶1、种类:2、作用部位:两类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶是磷酸二酯键是磷酸二酯键(扶手)不是氢键不是氢键(梯子)DNADNA连接酶连接酶可把黏性末端可把黏性末端之间的缝隙之间的缝隙“缝合”“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的接起来,这样一个重组的DNADNA分子就形成分子就形成了。了。限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择?连接黏性末端连接黏性末端和平末端分类作用E.coliDNA连接酶连接酶T4DNA连接酶DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点?DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链连接部位双链在两DNA片断之间形成磷酸二脂键单链将单个核苷酸加到已存在的核酸片断3’末端形成磷酸二脂键三、基因进入受体细胞的载体要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。基因工程的载体被喻为:分子运输车基因工程的载体来源:质粒质粒噬菌体噬菌体动植物病毒动植物病毒认识常用的载体认识常用的载体————质粒质粒质粒是基因工程常用的载体,是独立于染色体之外、能自主复制的小型环状DNA分子,对宿主细胞没有影响,主要存在于细菌和酵母菌体内。其中最常用的是大肠杆菌质粒。2、能否用SARS病毒作为基因载体?3、作为载体,若没有切割位点将怎样?4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞,如何鉴定?5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制,将怎样?1、从化学组成来看,载体应含有什么成分?双链双链DNADNA不能不能...

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