电脑桌面
添加小米粒文库到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸VIP免费

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸_第1页
1/5
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸_第2页
2/5
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸_第3页
3/5
第21卷第1期2006年3月天津科技大学学报Jour衄lofTianjinUniVersi够ofScience&Tech∞logyV01.21N0.1Mar.2006反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸高年发,吴迪,张健(天津市工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300222)摘要:提出一种利用反向高效液相色谱法(RP-HPLc)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸的方法。应用反相c,。色谱柱0DS-2HYPERSIL250mm×4.6mm5斗m,以0.05m01.L.1NH4H2P04(用H3P04调pH2.6)为流动相,发酵液经稀硫酸预处理后直接进样分离定量,每一样品的分析过程不超过5min,可及时了解丙酮酸发酵过程中丙酮酸的变化,适于发酵液中丙酮酸的检测。关键词:反向高效液相色谱法;丙酮酸发酵液;丙酮酸中图分类号:TQ921.7文献标识码:A文章编号:1672_6510{2006)01m021JD4Deterlni的tionofPymVateinPy川VateFe珊entationBmth协Reve玛ed-ph嬲eHigh—perfo珊anceLiqllidChromatog咫phy(RP-HPLC)GAONi锄-fa,WUDi,ZHANGJi锄(TianjinKeyLaboratoryofIndustrialMicmbiology,CollegeofBiotechnology,TianjinUniVersityofScience&Technology,Tianjin300222,China)Abst髓ct:ARP-HPLCmethodforthedetenninationofpyruvateinpyruvatefe瑚entationbrothw鹊developed.0DS-2HY-PERSILC18columnwasusedandmobileph髂ewasO.05m彬LNH4H2P04(adjustedtopH2.6witllH3P04).码e801u—tion0fs砌plespre—treated硒tht11esolutionofs幽ricacidwauldbed反emined,nea11alysispmcesswouldbe矗nishedinfiveminutes.Themethodwaspmvedarapide珏.ectivewaytodete邛【linethepyruvateinpymvatefe册emationbmth.融”恻心:reversed—ph船ehighpe艋nanceliquidchromat唧ph(RP—HPLC);p)rnlvatefe珊entationbrotll;pyruvate丙酮酸是机体代谢的重要中间代谢产物,是多种氨基酸、维生素以及其他一些有用物质合成的重要前体,在化工、制药和农用化学品工业中有广泛的用途¨J。由于近年来丙酮酸所具有的独特的减肥效果,丙酮酸的世界需求量迅速增长,价格居高不下,引起生产和研究的热潮旧J。丙酮酸及其他有机酸,可采用气相色谱分离。但采用气相色谱法进行有机酸分析时,常因有机酸的沸点较高、不易气化而需要先对其衍生再进行测定旧J,方法繁琐;同时又因有机反应不易定量进行而直接影响测定结果的准确性。早期的有机酸液相色谱测定方法,大多是采用阳离子交换法分离,然后以示差检测器检测。其检测器影响因素多,灵敏度收稿日期:2005.05—13作者简介:高年发(1945一),男,江苏吴江人,教授,博士生导师低,样品需要富集HJ,而且离子柱与反相c,。色谱柱相比,价格昂贵,适用范围窄。目前反相高效液相色谱(RP—HPLc)是应用最广泛的液相色谱法,本文进行了RP—HPLC法测定发酵液中丙酮酸含量的研究,并把用离子柱sCR-101H¨1与用反相C。8色谱柱ODsl2HY—PERSIL两种色谱柱的测定方法的测定参数作了比较。提出一种利用反向高效液相色谱(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸的方法,确定了最佳色谱分离条件,可对丙酮酸发酵液定性定量分析,从而指导菌种选育和发酵条件的研究,为以后进行这方面的研究提供条件。万方数据·22·1材料与方法1.1仪器与设备ssIPC2000型高压液相色谱仪(SsIⅢ型输液泵,500型紫外可见检测器,ANASTAR色谱工作站);LD5—10型低速离心机(北京医用离心机厂);sP-2102uV型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);循环水式多用真空泵sHBⅢ(河南省巩义市站街光亚仪器厂);PHs.3c型精密pH计(上海精密科学仪器有限公司);AS2120A.型超声波清洗器(天津奥特赛恩思仪器有限公司);移液枪(日本制造)。1.2主要试剂超纯水;葡萄糖(色谱纯);H,PO。(生化试剂);NH。H:PO。(分析纯),天津市凯通化学试剂有限公司;甲醇(色谱纯),天津康科德科技有限公司;硫酸(分析纯),天津兴华化学试剂厂;丙酮酸(生化试剂),中国医药(集团)上海化学试剂公司;仅一酮戊二酸(色谱纯),SigIlla公司。1.3实验方法1.3.1有机酸标准样品的选择分别准确称取10、20、40、60、80mg丙酮酸置于100mL容量瓶中,用超纯水溶解并定容,配制成丙酮酸标样系列溶液。...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在违规,或者侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“违规举报”。

碎片内容

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸

确认删除?
VIP
微信客服
  • 扫码咨询
会员Q群
  • 会员专属群点击这里加入QQ群
客服邮箱
回到顶部