聂素云等：交联透明质酸的降解及其释药性能1907交联透明质酸的降解及其释药性能*聂素云，卢文庆，冯晓健，邹孔标（南京师范大学化学与环境科学学院，江苏南京210097）*基金项目：江苏省生物医药功能材料工程研究中心资助项目（JHjd03-008）收到稿件日期：2007-07-30通讯作者：卢文庆作者简介：聂素云（1977－），女，硕士，从事生物医药功能材料的研究。摘要：用己二酸二酰肼(ADH)对透明质酸(HA)进行化学修饰，制备交联透明质酸（HA-ADH）薄膜。粘度法测试表明HA-ADH是一种可降解的生物材料，并且与HA相比，HA-ADH的降解速率减慢。在此基础上，研究了以疏水性的替硝唑(TDZ)和亲水性的头孢唑啉钠(CEZ)为模拟药物的HA-ADH药物载体薄膜的释药性能。紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱检测表明，HA-ADH是一种疏水性药物TDZ的优良缓释制剂，这是由于TDZ的疏水性和HA-ADH薄膜的缓慢溶胀和降解性能的结合而得到的，药物的释放主要受扩散机制控制。关键词：透明质酸；交联；特性粘度；可降解薄膜；药物释放中图分类号：O636.1文献标识码：A文章编号：1001-9731(2007)增刊-1907-041引言HA具有高度粘弹性、可塑性、渗透性以及良好的生物相容性，因此HA在眼科手术、治疗关节炎、药物载体方面有较多应用[1]。但是，天然HA水溶性极强、在组织中易扩散和降解，体内存留时间较短，所以应用上受到限制。研究[2]表明HA经酰肼（ADH）修饰成HA-ADH后，降低了高聚物的溶解能力，制备出可溶胀的多孔薄膜，延长了薄膜在缓冲溶液中的存留时间。有文献报道，ElisabettaEsposito等[3]，曾将HA的衍生物应用于研究制备靶向和控释药物。HA-ADH以其优良的性能，应当在药物载体的开发上有巨大潜力。本文测定了HA和HA-ADH的特性粘度和用粘度法考察了HA-ADH在磷酸盐缓冲溶液（Na2HPO4-KH2PO4，pH7.3)中的降解情况。在此基础上，分别以亲水性的头孢唑啉钠(CEZ)和疏水性的替硝唑(TDZ)为模拟药物，制备出载CEZ的HA-ADH(CEZ/HA-ADH)和载TDZ的HA-ADH(TDZ/HA-ADH)薄膜，并用紫外分光光度（UV-Vis）法比较了2种载药薄膜在磷酸盐缓冲溶液中的释药性能。2实验2.1试剂和仪器HA(福瑞达生物化工有限公司)；乙基(N,N-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDCI，四川琢新生物材料研究有限公司)；ADH(海曲化工有限公司）；TDZ(中国石药集团)；CEZ(中国石药集团)；其它试剂均为分析纯；实验用水为二次蒸馏水。DC-2600低温恒温槽；S-212电动恒速搅拌器；DZF-3型真空干燥箱；JEOLJSM-5610LV型扫描电子显微镜；透析袋(分子量：8000～10000)；聚四氟乙烯培养皿(自制)；乌氏粘度计(φ＝0.5～0.6mm)；紫外-可见分光光度计(Lambda17)。2.2HA-ADH膜的制备用溶剂挥发法制备HA-ADH薄膜。按HA/ADH的质量比为1∶8的比例将ADH加入质量分数为0.5%的HA溶液中，按文献[4]方法合成HA-ADH，反应至pH不再变化时，用0.1mol/LNaOH调至pH为7.0，停止反应。将混合液装入透析袋内，用二次水渗析提纯后，倾入聚四氟乙烯培养皿中，室温干燥，得HA-ADH薄膜。分别将一定量的TDZ和CEZ加入HA-ADH溶液中搅拌使其混合均匀，然后将混合液倾入聚四氟乙烯培养皿中，室温成膜，分别得到TDZ/HA-ADH和CEZ/HA-ADH载药薄膜。2.3特性粘度的测定及溶液的降解将新制备的HA-ADH溶液和0.2mol/LNaCl溶液混合得一定浓度的HA-ADH溶液，参照文献[1]的方法分别测定HA和HA-ADH的特性粘度[η]。再根据Mark-Houwink方程：[η]＝3.6×10-4Mη0.78，求得HA的粘均相对分子质量Mη。在特性粘度的测定中，为了使得比浓粘度ηsp/C与浓度C成线性关系，通常选用相对粘度ηr值在1.2～2.0的浓度范围。取5ml产物溶液先用红外干燥除去大部分溶剂，再置于真空干燥箱中干燥至恒重，称重，可求得HA-ADH的浓度。用粘度法考察HA-ADH在磷酸盐缓冲溶液(Na2HPO4-KH2PO4，pH7.3)中的降解情况[5]。取新制备的HA-ADH溶液，用磷酸盐缓冲溶液将其配制成0.0410g/100ml的溶液，37℃恒温。每隔一定时间取出溶液，测定溶液的流出时间ti和磷酸盐缓冲溶液的流出时间t0。由测定的t0、ti求出相对粘度ηr和增比粘度ηsp，然后结合经验公式[η]＝{2(ηsp－㏑ηr)}0.5计算特性粘度19082007年增刊（38）卷功能材料[η][6]。以[η]-t作曲线，考察[η...
