·论著·基金项目:江苏省教委自然科学基金资助项目(JW970091);江苏省科委应用基金资助项目(BJ980083);江苏省卫生厅重点资助项目(H2011)作者单位:210029南京医科大学第一附属医院神经内科通信作者:丁新生,Email:xsding@public11ptt1js1cn脊髓性肌萎缩症基因诊断李文磊丁新生吴婷姚娟邓晓萱【摘要】目的探讨中国人儿童型脊髓性肌萎缩症(SMA)的基因序列、基因缺失情况及错配聚合酶链反应2限制性片段长度多态性分析(PCR2RFLP)技术在儿童型SMA基因诊断中的价值。方法应用错配PCR2RFLP分析对34例拟诊为儿童型SMA(Ⅰ型18例,Ⅱ型11例,Ⅲ型5例)的患者、20名SMA患者的健康家系成员及20名健康人进行运动神经元存活基因(SMN)7号外显子缺失检测,并选择1例SMA患者的SMNc和1例健康人的SMNt基因7号外显子进行基因测序。结果34例拟诊SMA患者31例(9112%)有SMNt7号外显子缺失,其中Ⅰ型18例,Ⅱ型10例,Ⅲ型3例,所有健康人均无SMN7号外显子缺失。SMNc和SMNt基因7号外显子测序长度均为187bp,两者的序列只有1个碱基的差异(T→C),与国外报道一致。结论中国人儿童型SMA基因序列与国外报道一致,Ⅰ～Ⅱ型基因缺失频率高,Ⅲ型缺失频率较低,错配PCR2RFLP可作为诊断Ⅰ、Ⅱ型SMA的有效手段。【关键词】肌萎缩症,脊髓性;碱基错配;聚合酶链反应;染色体,人,7对GeneticdiagnosisandgenesequencingofspinalmuscularatrophyLIWen2lei,DINGXin2sheng,WUTing,YAOJuan,DENGXiao2xuan1DepartmentofNeurology,theFirstAffiliatedHospitalofNanjingMedicalUniversity,Nanjing210029,ChinaCorrespondingauthor:DINGXin2sheng,Email:xsding@public11ptt1js1cn【Abstract】ObjectiveTostudygenesequenceandthefrequencyofgenedeletionofchildhood2onsetspinalmuscularatrophy(SMA)inChina,andthevalueofthemismatchingpolymerasechainreaction2restrictionfragmentlengthpolymorphism(PCR2RFLP)ingenediagnosisonSMA1MethodsPCR2RFLPmethodwasusedtodetectthehomozygousdeletionoftheexon7ofSMNgenein34presumedSMApatients(18withtypeⅠ,11withtypeⅡ,5withtypeⅢ)and20normalfamilialmembersofthesepatientsand20normalindividuals1Meanwhile,centromericSMNgeneofoneSMApatientandtelomericSMNgeneofonenormalmemberwereselectedtoperformgenesequencing1ResultsHomozygousdeletionofexon7oftheSMNgenewasdetectedin31of34(9112%)casesofpresumedSMA,amongwhich18intypeⅠ,10intypeⅡ,3intypeⅢ,andnohomozygousdeletionwasfoundinthenormalcontrols;thesequencelengthsoftheexon7oftelomericandcentromericSMNgenewereboth187bp,andtherewasonlyonenucleotidedifferencebetweenthetwosequences(T→C),whichwasidenticaltoforeignreports1ConclusionsThegenesequenceofChinesepatientswithchildhood2onsetSMAwascoincidenttoforeigners,thepercentageofhomozygousdeletionoftheexon7oftheSMNgenewashighintypeⅠandⅡSMApatients,yetthepercentagewaslowintypeⅢSMApatients.MismatchingPCR2RFLPmightberecommendedasaneffectivediagnosisfortypeⅠandⅡSMApatients1【Keywords】Muscularatrophy,spinal;Basepairmismatch;Polymerasechainreaction;Chromosomes,human,pair7脊髓性肌萎缩症(spinalmuscularatrophy,SMA)是一组遗传性下运动神经元变性疾病。其主要表现为进行性、对称性肌无力和肌萎缩,儿童和成人均可发病。1995年,Lefebvre等[1]克隆到SMA的致病基因运动神经元存活基因(survivalmotorneuronalgene,SMN),并发现9817%(226/229)的儿童型患者存在SMNt基因缺失或中断,自此通过检测SMNt基因缺失情况的基因诊断成为本病主要的确诊方法。我们于1997年起就在国内率先应用错配聚合酶链反应2限制性片段长度多态性(PCR2RFLP)分析进行该病的基因诊断,2003年7月至·624·中华神经科杂志2005年7月第38卷第7期ChinJNeurol,July2005,Vol38,No.7©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net2004年8月又对SMN基因7号外显子进行了基因测序,以探讨中国人SMA(主要是儿童型)的基因序列...
