第16卷第2期2010年06月分析测试技术与仪器ANALYSISANDTESTINGTECHNOLOGYANDINSTRUMENTSVolume16Number2June2010分析测试新成果(108~112)固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定食品中碱性橙、碱性嫩黄O王建伟,钟海娟,梁炽琼(佛山市质量计量监督检测中心,广东佛山528225)摘要:建立了固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法同时检测食品中碱性橙、碱性嫩黄O的方法,样品提取液采用C18固相萃取柱净化,用超高效液相色谱-串联质谱法在3min内完成分离检测.碱性橙、碱性嫩黄O方法检出限(S/N=3)分别为0.34、1.28Lg/kg;定量下限(S/N=10)分别为1.13、4.27Lg/kg.回收率为80.1%~95.3%.方法分析时间短、灵敏度高且准确可靠,能满足食品中低含量碱性橙、碱性嫩黄O的同时定性定量分析要求.关键词:超高效液相色谱;串联质谱;碱性橙、碱性嫩黄O;固相萃取中图分类号:O657.33文献标识码:B文章编号:1006-3757(2010)02-0108-05碱性橙,CAS:532-82-1,别名盐基金黄、盐基杏黄、王金黄等;碱性嫩黄O,CAS:2465-27-2,别名盐基淡黄O、盐基槐黄、碱性荧光黄GR,其结构如图1所示.碱性橙、碱性嫩黄O均为芳香胺类碱性工业染料,主要用于纺织、印染工业等方面,但严禁作为食品添加剂用于食品中.近年来,有报道[1]表明一些不法生产商在腐竹、豆皮等豆制品加工中用来染色.这类芳香胺类物质对人的身体健康构成严重威胁,长期摄入会致癌.图1碱性橙(a)和碱性嫩黄O(b)的结构示意图Fig.1StructuresofChrysoidin(a)andAuramineO(b)碱性橙、碱性嫩黄O的检测常采用紫外分光光度法、薄层色谱法[2].近几年,高效液相色谱法检测碱性橙、碱性嫩黄O也有一些文献报道[3-7].最近有报道[8]采取液液萃取净化、串联质谱检测碱性橙和碱性嫩黄O,方法检测灵敏度高,但萃取纯化消耗有机溶剂较多,且操作相对较繁琐.本文建立了以酸性甲醇提取、C18固相萃取柱净化,利用超高效液相色谱分离,串联质谱多反应监测(MRM)方式同时检测碱性橙和碱性嫩黄O的含量的方法,取得了较为满意的结果.1实验部分1.1仪器与试剂超高效液相色谱-三级四极杆质谱联用仪(Waters.UPLC-QuattroPremierXE)固相萃取仪(12孔,SUPELCO);固相萃取小柱[C18(SUPELCO,6mL)];氮吹仪(美国OR公司);超声仪(天津市恒奥科技发展有限公司);漩涡混合器(上海精科实业有限公司);超纯水器(UltraGenetic,英国ELGA公司).甲醇、乙腈为色谱纯试剂,甲酸、氨水、盐酸为分析纯试剂,超纯水.碱性橙、碱性嫩黄O标准物质(ACROSORGANICS,Pure).1.2标准溶液配制准确称取0.0100g碱性橙、碱性嫩黄O,以甲醇溶解并定容于100mL容量瓶作为标准储备液,再收稿日期:2010-01-04;修订日期:2010-02-08.作者简介:王建伟(1974-),男,硕士研究生,工程师,主要从事食品检测与研究.E-MAIL:wangjw025@163.com第2期王建伟,等:固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定食品中碱性橙、碱性嫩黄O以甲醇稀释成浓度为1.0Lg/mL的中间溶液,使用时以流动相稀释成浓度分别为5、10、20、50、100ng/mL的标准工作溶液.1.3仪器分析条件1.3.1液相色谱参数色谱柱:WatersBEHC182.1@100mm,1.7Lm;柱温:30e;流动相:V(甲醇)BV(水)=60B40(含011%甲酸);流速:0.2mL/min;进样量:10LL.1.3.2质谱参数电喷雾正离子(ESI+)离子化模式,多反应监测(MRM)质谱检测方式,离子源温度110e,脱溶剂气温度350e,锥孔反吹气流量50L/h,脱溶剂气流量500L/h,碰撞气(高纯氩)流量0.12mL/min.MRM监测参数见表1.表1碱性橙、碱性嫩黄O质谱检测MRM参数Table1MRMparametersforChrysoidinandAuramineO化合物名称离子对驻留时间/s毛细管电压/kV锥孔电压/V碰撞能/eV碱性橙212.9>120.8*0.22.03525212.9>76.80.22.03525碱性嫩黄O268.1>146.8*0.22.03535268.1>121.80.22.03535*:为定量离子对1.4样品处理1.4.1提取称取固体样品2g,,粉碎混匀,称取半固态、液态样品5g于50mL塑料离心管中,加入15mL10%乙酸甲醇溶液涡旋振荡1min,超声提取30min,4000转离心10min,取上清液;按上法再提取1次,合并上清液并于50e氮吹浓缩至10mL,以氨水调至近中性,如有沉淀再离心.1.4.2净化分别以3mL甲醇、3mL水活化C18固相萃取小柱,将上清液加入萃取柱中,保持流出液速度约1mL/min,以10mL40%甲醇水溶液洗涤杂质.以10mL85%甲醇水溶液洗脱,收集洗...
