核酸凝胶电泳技术MadebylionchpMadebylionchp一原理•电荷效应：Q↑→V↑（可忽略）•分子筛效应：M↑→V↓（主要）•电渗：不计→M↑V↓※核酸显酸性，在缓冲液中带负电：向正极电泳•电泳速率影响因素：DNA大小、形状、带电量※三种质粒电泳速率二三种凝胶电泳•琼脂糖凝胶电泳：特点：平躺式、影响因素DNA构象：镶入染料：•SDS-PAGE：特点：竖式电泳，精确SDS的作用：•脉冲场电泳：优点：分离能力更强原理：三电泳后的观察-EB染色•EB：溴乙锭，可镶嵌入，核酸的碱基对平面间对DNA染色，300nm紫外灯下发出橘黄色荧光※EB嵌入碱基对间，可引起DNA框移：有毒，可破坏DNA•观察方法：电泳后，300nm紫外线照射，发荧光处为DNA※DNA量越大，荧光越强四电泳缓冲液要求•有缓冲液，DNA才电离：带负电，向正极移动•三种常用缓冲液：TAE：Tris-乙酸+EDTATBE：Tris-硼酸+EDTATPE：Tris-磷酸+EDTA五对照物-Marker※本章总结
