双转基因阿尔茨海默病模型VIP免费

文章编号:100025404(2006)1421453204论著PS1/APP双转基因阿尔茨海默病模型传代小鼠的基因型鉴定及其组织学分析宋敏1,唐军2,李达兵2,徐海伟2,白云1(第三军医大学基础医学部:1医学遗传学教研室,2生理学教研室,重庆400038)提要:目的对所获的PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定,进一步对其进行组织学分析,检测老年斑(senileplaque,SP)的形成情况。方法设计特定的引物,PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,对转入PS1/APP的小鼠应用刚果红染色结合免疫组化观察Aβ沉积、小胶质细胞和星型胶质细胞的活化。结果与未转入的阴性对照相比,在PS1/APP双转基因的AD小鼠皮质和海马内可见Aβ斑块形成,围绕在Aβ斑块周围的小胶质细胞和星形胶质细胞处于活化状态,形成典型的SP结构。结论我们获得的PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD患者脑内的主要病理过程,提供有效的实验动物模型。关键词:阿尔茨海默病;转基因小鼠;老年斑中图法分类号:R394233;R394.2;R749.16文献标识码:AGenetypeidentificationandhistologicanalysisofPS1/APPdoubletransgenicAlzhei2merdiseasemousemodelSONGMin1,TANGJun2,LIDa2bing2,XUHai2wei2,BAIYun1(1DepartmentofMolecularGenetics,2DepartmentofPhysiolo2gy,CollegeofMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:ObjectiveToidentifythegenetypeofthePS1/APPdoubletransgenicmousemodel,analysethetissuehistologyanddetecttheformationofthesenileplaque.MethodsThespecificprimerwasdesignedandtheAPPgenewasamplifiedbyPCRfromthemousegenomeDNA.TheAβdeposits,activationofmicrogliaandastrocytewereobservedbythecongoredstainingandimmunohistologicmethods.ResultsAscomparedtothenegativecontrol,thePS1/APPmousedisplayedAβdepositsrestrictedtocorticalandhippocampalstruc2tures,theactivatedmicrogliaandastrocytesurroundedtheplaque,thustheclassicsenileplaquestucturewasformed.ConclusionThedoubletransgenicPS1/APPmouseproducedbythetwomiceweboughtfromAmeri2canJacksonLaboratorycouldsimulatethespecificpathogenesisofAlzheimerdiseaseandbetheefficientexperi2mentalanimalmodel.Keywords:Alzheimerdisease;transgenicmouse;senileplaque阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)作为一种病因尚未完全明了的神经退行性疾病,其发病机制的研究一直是神经科学研究的热点。目前,Aβ炎性假说[1]因其能够较好的符合病理学、实验以及临床流行病学研究结果而受到越来越多研究者的承认。该学说认为:Aβ(β2amyloid)42肽在脑内的异常基金项目:国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金资助项目(30228018)SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina2JointResearchFundforOverseasChineseYoungScholars(30228018)作者简介:宋敏(1979-),男,江西省九江市人,博士研究生,助教,主要从事神经免疫方面的研究。电话:(023)68753925通讯作者:白云,电话:(023)68752258,E2mail:geneby@yahoo.com.cn收稿日期:2005206229;修回日期:2005209218沉积是AD致病的关键和始动因素。Aβ42肽由淀粉样蛋白跨膜前体蛋白(amyloidprecursorprotein,APP)经过内源性分泌酶裂解后的跨膜区和胞外区片段组成。在正常情况下,APP裂解后大部分是纤维原性较低、不易聚集的Aβ40肽,只有5%～10%是较长的、纤维原性较高的Aβ42肽,并通过正常的生理机制降解。而在AD患者中,由于基因突变或者清除机制障碍导致Aβ42增多,其在体外彼此通过高度的疏水作用而聚合成寡聚体,进而形成纤丝沉积直至形成较致密的斑块,从而导致氧化应激、破坏离子平衡、激活补体系统、活化小胶质细胞和星型胶质细胞等途径导致引发一系列的病理学变化和相应的临床表现[2]。针对Aβ炎性假说,目前构建了多种实验动物模3541第28卷第14期2006年7月第三军医大学学报ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEVol.28,No.14Jul.2006型。如侧脑室直接注射Aβ多肽以及APOE、早老素21(presenilin1,PS21)、β2淀粉样前体蛋白(β2amyloidprecursorprotein,β2APP)转基因动物...