第12卷第3期1999年8月同位素JournalofIsotopesVol.12No.3Aug.1999牙龈组织TNF-Α含量的RIA及其与牙周炎相关关系的观察赵敬杰杨霞侯桂华王维岳王浩丹(山东医科大学同位素室,济南250012)贾红英李岩涛(山东医科大学卫生统计教研室,济南250012)(山东医科大学口腔医院内科,济南250012)摘要选取了42例牙周炎患者和15例正常人作对照,采用放射免疫检测方法对牙周炎龈组织及正常龈组织中TNF2Α含量进行测定,并分析其与部分牙周临床指标的相关性。结果表明:牙周炎组与对照组相比,有显著性差异。这说明TNF2Α参与了牙周病的发病过程。TNF2Α与临床指标的关系,进一步说明TNF2Α与牙周炎症程度及组织破坏有关。关键词牙周炎龈组织TNF2Α放射免疫分析中图法分类号R8171498R781141肿瘤坏死因子(TNF2Α)是一种具有多种生物学活性的糖蛋白,不仅能抗肿瘤,抗病毒,而且在炎症反应和免疫应答中发挥作用,被视为重要的炎症介质之一[1]。离体实验证明:TNF2Α能刺激骨吸收及抑制骨形成,也是刺激前列腺素与蛋白酶产生的主要因子[2]。这提示TNF2Α可能与牙周病变过程中的组织破坏有关,使其成为近年来牙周病学研究的一个热点。本工作拟采用RIA对牙龈组织中TNF2Α的含量进行检测,并将其与牙周临床指标进行相关分析,以阐明TNF2Α在牙周病中的作用,为进一步研究牙周病的发病机理及今后通过免疫调节或抗炎治疗牙周病提供实验及理论依据。1实验材料111研究对象(1)对照组:即健康牙龈组(H),共15例,其中男7例,女8例;年龄12~45岁,平均年龄2512岁。所取牙龈色泽正常,质地坚实,无充血水肿,无探诊疼痛及出血等炎症表现。龈沟在2mm以内,口腔卫生较好[3]。(2)牙周炎组:共42例,测定牙牙龈松软红肿,X线检查牙槽骨有不同程度的水平吸收或角形吸收,牙周袋深度≥4mm,所测牙均无龋洞。根据年龄、临床症状、X线检查又分为两组,即成人牙周炎组(AP)与快速进展型牙周炎组(RPP)。AP:共30例,其中男16例,女14例;年赵敬杰:男,27岁,实验师,实验核医学专业收稿日期:1998211210修改稿收到日期:1999205220龄21~68岁,平均年龄4411岁。病例选择标准:患者均为成年人,30岁以上多见;病变可局限少数牙,也可散在分布;病变发展缓慢,病程长。RPP:共12例,其中女8例,男4例,年龄19~33岁,平均年龄2712岁。病例选择标准:年龄小于35岁;病损广泛,感染多数牙,无一致性分布;病史短,牙槽骨吸收速度快,迅速出现牙齿松动、移位,X线片示牙槽骨有严重的垂直及水平吸收[3]。所有受试者皆无明显全身性疾病,近半年未做过任何牙周治疗,3个月内未用过抗生素、止痛剂及免疫制剂。112主要仪器及试剂TNF2Α放免药盒由中国原子能科学研究院同位素研究所提供;Χ25500计数器由美国Backman生产;美国杜邦RC3C大容量离心机;杭州仪表电机厂生产的06022F型组织匀浆机;美国WM�250�52�P振荡器;瑞士mettlerPM100电子天平;美国Series500超低温冰箱。2测定方法211龈沟液量的测定取与龈沟液成分相似的正常人血清为标准,用5ΛL加样器分别取011、012、013⋯⋯114、115、210、510ΛL的血清滴于定量分析滤纸,然后用游标卡尺测量其浸湿面积;每个点重复两次,取其平均值绘制标准曲线,用相关系数公式计算标准血清量与滤纸浸湿面积间的相关性,并求出回归方程。龈沟液的收集:在行临床指标检查之前收集龈沟液。除去龈沟液收集部位的龈上牙石和菌斑,将患牙擦干,棉卷隔湿,气枪轻轻吹干牙面。取同样规格的滤纸条插入患牙近中颊侧或远中颊侧的牙袋内,有阻力感时停止插入,留置1min后取出,放入空微离心管中。若滤纸上有血则弃去,重新选牙。用游标卡尺测量滤纸浸湿面积,依据标准曲线,计算出相应的龈沟液量。212牙周袋深度(PD)和出血指数(BI)的测定用标准刻度探针测定牙周袋深度和出血指数。牙周袋深度根据其探诊深度分为3度[4]:�度(PD≤2mm):袋底至龈缘距离≤2mm,X线片示牙槽骨无吸收;�度(2mm
6mm):X线片示牙槽骨吸收>1�2根长。龈出血指数参考文献[4]的标准分为四度。�度:轻探龈沟时不出血;�度:轻探龈沟时出血,牙龈外观正常;�度:探龈沟时出血,牙龈变红,无肿胀;�度:牙龈有溃疡或其它症状。213龈组织TNF-Α含量的测定21311牙龈标本的采集和处理对照组的...