第33卷第3期2005年8月Journal0河南师范大学学报(自然科学版)HenanNormal[Iniversitv(NaturalScience)Z．33No．3AU．2005文章编号：1000—2367(2005)03—0098—04温度骤降对锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响孔祥会。，边中春，王桂忠。，李少菁。(1．河南师范大学生命科学学院，河南新乡453007；2河南师范大学图书馆，河南新乡453007；3．厦门大学海洋学系，国家海洋环境科学重点实验室，福建厦门361005)摘要：锯缘青蟹是生活在河口海区的一种重要经济甲壳动物，其生活的环境温度经常发生温度的骤然增高或降低．本研究采用生物化学的方法对温度骤降后不同时间锯缘青蟹鳃，肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖含量进行测定．结果显示锯缘青蟹可溶性蛋白和可溶性糖含量在骤降温初期(2h)升高，骤降温2h后可溶性蛋白虽然呈现波动性变化，但最后出现明显下降；骤降温2h后可溶性糖含量在鳃中逐渐下降，而在肝胰腺和肌肉中呈现波动性下降．实验结论为锯缘青蟹骤降温初期可溶性蛋白和可溶性糖增高是机体对寒冷应激的一种积极反应，后期下降是生理反应中物质和能量消耗所致．关键词：可溶性蛋白；可溶性糖；温度骤降；锯缘青蟹中图分类号：Q594文献标识码：A蛋白质在动物生命活动中发挥着极其重要的作用．研究机体可溶性蛋白含量变化可以反映蛋白质合成和消耗的动态过程，也可以反映外界环境变化时蛋白质方面所作出的应答．水生甲壳动物组织可溶性蛋白方面的研究已有很多报道见文献[1～5]，研究表明体内可溶性蛋白的变化与生理活动具有密切相关性．可溶性糖主要是指能够水中溶解的葡萄糖，糖元或多糖，在动物生命过程中提供能量，或转化为其它物质．温度变化可影响鱼类组织可溶性糖含量的变化[6]，虾蟹类中也有关于可溶性糖的相关报道见文献[1～3]．因而可溶性糖可以作为研究变温动物环境反应的一项生化指标．锯缘青蟹是生活在河口海区的一种重要甲壳动物，其环境温度经常发生骤然降低或升高．本实验主要对锯缘青蟹在环境温度骤降后不同时间体内可溶性蛋白与可溶性糖含量的变化进行研究，以期揭示温度骤变后锯缘青蟹不同器官、组织可溶性蛋白和可溶性糖的变化规律，旨在为青蟹养殖和渔业管理提供生产指导．1材料与方法1．1实验材料1．1．1锯缘青蟹骤降温处理实验用蟹来自厦门海区，体色鲜艳，无病无伤，附肢齐全，头胸甲宽(8．29±0．34)cm，头胸甲长(5．85±0．26)cm，体重为(145-+-20)g的雄性青蟹用于实验．青蟹室温暂养适应1周后，然后直接置于4℃低温环境下骤降温处理(此时室温为28℃左右)．在处理时间为0h、2h、4h、6h、8h、10h时分别随机取出6只青蟹，解剖取样．1．1．2粗提液样品制备取样时剪开头胸甲，迅速取出鳃，肝胰腺和肌肉，分装于不同的离心管中，置于一80℃冰箱．制样时，称收稿日期：2005—03—14基金项目：国家“863”重大专项(2002AA603013)作者简介：孔祥会(1968一)，男，河南虞城人，河南师范大学副教授，博士，主要从事水生动物生理生化，免疫防护与分子进化研究．维普资讯http://www.cqvip.com第3期孔祥会等：温度骤降对锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响99取组织0．2g，按质量体积比1：9(1g组织：9ml缓冲液)加入0．9生理盐水进行冰浴匀浆，然后在4℃，6000r／min(相对离C,2：3824g)的条件下离心15rain，取上清液分装，置于一20℃冰箱备测，l周内完成测定．1．2实验方法蛋白定量采用考马斯亮蓝G一250比色法，参照Bradford(1976)方法进行测定．牛血清白蛋白(Bovineserumalbumin，BSA)作为标准蛋白．粗提液用偏磷酸除去蛋白后对可溶性糖进行定量，其测定方法采用蒽酮比色法[9．1．3统计分析采用MicrosoftExcel2000软件中的统计分析工具进行单因素方差分析(One—WayANOVA)和独立性t检验(Student's检验)．2结果2．1温度骤降后锯缘青蟹不同器官、组织可溶性蛋白的变化温度骤降后不同时间锯缘青蟹鳃中可溶性蛋白的变化见图1(a)，未处理组(0h)可溶性蛋白为(2．69±0．53)g／L；2h、4h时增加，分别达到(3．92±0．54)g／L，(3．69-0．55)g／L，并显著高于未处理组(P<0．01)．6h、8h、10h也高于未处理组，只是8h时显著高于未处理组(P
