TreatmentofratcranialdefectwithautogeneticminimalmorselizedboneandallogeniccellsMASong,YANJingLong,LINXin,PANHaiTao,WANGXinTao,YANGXianShengDepartmentofOrthopaedics,TiantanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100050,China,DepartmentofOrthopaedics,FirstAffiliatedHospital,HarbinMedicalUniversity,Harbin150001,China【Abstract】AIM:Toinvestigatethecombinedtreatmenteffectsofautogeneticminimalmorselizedboneandallogeniccellsonratcranialdefect.METHODS:Cranialdefectinratmodelswasrepairedwithautogeneticminimalmorselizedbonegraftandallogeniccelltransplantation[osteoblastsormarrowstormalcells(MSC)].Xraywastakentounderstandtheunioncondition,andRTPCRwasperformedtoexaminethemRNAexpressionsofTGFβ1andbFGF.RESULTS:IntheorderofcombinedtreatmentgroupA(morselizedboneandosteoblastgraft),combinedtreatmentgroupB(morselizedboneandMSCgraft),combinedtreatmentgroupC(minimalmorselizedboneonly),theuniontimeofcranialdefectprolongedas(7.33±0.44)wk,(8.67±0.69)wkand(11.67±1.52)wk,andtheexpressionofTGFβ1andbFGFemergedintheorder(P<0.05betweenevery2groups).CONCLUSION:Thecombinedtherapyofminimalmorselizedboneandallogeniccellsacceleratetherepairmentofcranialdefectandtheexpressionofcellfactors.【Keywords】cranialdefect;bonetransplantation;celltransplantation;minimalmorselizedbone【摘要】目的:观察自体微小颗粒骨复合骨髓基质细胞(MSC)或成骨细胞移植修复大鼠骨缺损的治疗效果.方法:制作大鼠颅骨缺损动物模型,培养同种异体新生大鼠的MSC及成骨细胞,复合自体颗粒骨后植入骨缺损区,X线摄片观察骨愈合情况;RTPCR检测转化生长因子β1(TGFβ1),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平.结果:植入微小颗粒骨复合成骨细胞组颅骨缺损愈合最快(7.33±0.44)wk,TGFβ1,bFGF表达出现早,与其他两组比较差异显著(P<0.05).植入微小颗粒骨复合MSC组颅骨缺损愈合时间居中(8.67±0.69)wk,TGFβ1,bFGF表达早于单纯微小颗粒骨组(P<0.05).单纯微小颗粒骨植入组颅骨缺损愈合慢(11.67±1.52)wk,TGFβ1,bFGF表达出现晚.结论:微小颗粒骨复合细胞移植修复颅骨缺损,细胞因子表达早,缺损愈合明显加快.【关键词】颅骨缺损;骨移植;细胞移植;微小颗粒骨0引言骨缺损的修复是骨科的研究热点之一,自体骨移植被认为是修复骨缺损的金标准,方法多采用块状或条状骨移植.颗粒骨移植近年来正逐渐受到重视,广泛应用于关节翻修手术中[1].微小颗粒骨有利于骨折愈合也有报道[2].我们通过微小颗粒骨复合细胞移植修复大鼠颅骨缺损,观察骨愈合情况及在此过程中转化生长因子β1(TGFβ1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况,探讨修复骨缺损的有效方法.1材料和方法1.1材料出生9d健康SD雄性大鼠144只,体质量200~220g由哈尔滨医科大学附属第二医院动物室提供;DMEM培养液购自美国Gibco公司;150mL/L胎牛血清冲,CO2培养箱,Ⅱ型胶原酶均购自美国Sigma公司.1.2方法将大鼠随机分为3组:单纯微小颗粒骨植入组(第1组),微小颗粒骨复合骨髓基质细胞(marrowstormalcells,MSC)组(第2组),微小颗粒骨复合成骨细胞组(第3组),每组48只.SD大鼠处死后750mL/L乙醇浸泡5min,双侧股骨髓腔DMEM加150mL/L胎牛血清冲洗,冲洗液加入培养瓶中置入CO2培养箱中培养MSC.取颅盖骨剪碎,以Ⅱ型胶原酶(1g/L)消化法[3]培养成骨细胞.每3d换液1次,长满瓶后消化,1∶2传代.1.2.1颅骨缺损的修复实验动物取髂嵴切口,取自体髂骨约1000mg磨钻制成直径300~500μm的颗粒,分别取培养的MSC及成骨细胞,消化后调整计数5×108/L,取5mL与颗粒骨混合后37℃水浴震荡90min备用.颅骨正中切口,显露大鼠顶骨及额骨,左侧顶骨正中制作5mm全层骨缺损,注意保持硬膜完整.颗粒骨及细胞混合液离心,将离心管底复合的颗粒骨及细胞植入骨缺损区,缝合切口.第1组:单纯植入颗粒骨;第2组:植入颗粒骨及MSC;第3组植入颗粒骨及成骨细胞.植入后3,...