微小颗粒骨复合细胞移植治疗大鼠骨缺损VIP专享VIP免费

TreatmentofratcranialdefectwithautogeneticminimalmorselizedboneandallogeniccellsMASong,YANJingLong,LINXin,PANHaiTao,WANGXinTao,YANGXianShengDepartmentofOrthopaedics,TiantanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100050,China,DepartmentofOrthopaedics,FirstAffiliatedHospital,HarbinMedicalUniversity,Harbin150001,China【Abstract】AIM:Toinvestigatethecombinedtreatmenteffectsofautogeneticminimalmorselizedboneandallogeniccellsonratcranialdefect.METHODS:Cranialdefectinratmodelswasrepairedwithautogeneticminimalmorselizedbonegraftandallogeniccelltransplantation［osteoblastsormarrowstormalcells(MSC)］.Xraywastakentounderstandtheunioncondition,andRTPCRwasperformedtoexaminethemRNAexpressionsofTGFβ1andbFGF.RESULTS:IntheorderofcombinedtreatmentgroupA(morselizedboneandosteoblastgraft),combinedtreatmentgroupB(morselizedboneandMSCgraft),combinedtreatmentgroupC(minimalmorselizedboneonly),theuniontimeofcranialdefectprolongedas(7.33±0.44)wk,(8.67±0.69)wkand(11.67±1.52)wk,andtheexpressionofTGFβ1andbFGFemergedintheorder(P<0.05betweenevery2groups).CONCLUSION:Thecombinedtherapyofminimalmorselizedboneandallogeniccellsacceleratetherepairmentofcranialdefectandtheexpressionofcellfactors.【Keywords】cranialdefect;bonetransplantation;celltransplantation;minimalmorselizedbone【摘要】目的：观察自体微小颗粒骨复合骨髓基质细胞（MSC）或成骨细胞移植修复大鼠骨缺损的治疗效果.方法：制作大鼠颅骨缺损动物模型，培养同种异体新生大鼠的MSC及成骨细胞，复合自体颗粒骨后植入骨缺损区，X线摄片观察骨愈合情况；RTPCR检测转化生长因子β1（TGFβ1），碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平.结果：植入微小颗粒骨复合成骨细胞组颅骨缺损愈合最快（7.33±0.44）wk，TGFβ1,bFGF表达出现早，与其他两组比较差异显著（P<0.05）.植入微小颗粒骨复合MSC组颅骨缺损愈合时间居中（8.67±0.69）wk，TGFβ1,bFGF表达早于单纯微小颗粒骨组（P<0.05）.单纯微小颗粒骨植入组颅骨缺损愈合慢（11.67±1.52）wk，TGFβ1,bFGF表达出现晚.结论：微小颗粒骨复合细胞移植修复颅骨缺损，细胞因子表达早，缺损愈合明显加快.【关键词】颅骨缺损；骨移植；细胞移植；微小颗粒骨0引言骨缺损的修复是骨科的研究热点之一，自体骨移植被认为是修复骨缺损的金标准，方法多采用块状或条状骨移植.颗粒骨移植近年来正逐渐受到重视，广泛应用于关节翻修手术中［1］.微小颗粒骨有利于骨折愈合也有报道［2］.我们通过微小颗粒骨复合细胞移植修复大鼠颅骨缺损，观察骨愈合情况及在此过程中转化生长因子β1（TGFβ1）及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况，探讨修复骨缺损的有效方法.1材料和方法1.1材料出生9d健康SD雄性大鼠144只,体质量200~220g由哈尔滨医科大学附属第二医院动物室提供；DMEM培养液购自美国Gibco公司；150mL/L胎牛血清冲，CO2培养箱，Ⅱ型胶原酶均购自美国Sigma公司.1．2方法将大鼠随机分为3组：单纯微小颗粒骨植入组(第1组)，微小颗粒骨复合骨髓基质细胞（marrowstormalcells,MSC)组(第2组)，微小颗粒骨复合成骨细胞组(第3组)，每组48只.SD大鼠处死后750mL/L乙醇浸泡5min，双侧股骨髓腔DMEM加150mL/L胎牛血清冲洗，冲洗液加入培养瓶中置入CO2培养箱中培养MSC.取颅盖骨剪碎，以Ⅱ型胶原酶（1g/L）消化法［3］培养成骨细胞.每3d换液1次，长满瓶后消化，1∶2传代.1.2．1颅骨缺损的修复实验动物取髂嵴切口，取自体髂骨约1000mg磨钻制成直径300~500μm的颗粒，分别取培养的MSC及成骨细胞，消化后调整计数5×108/L，取5mL与颗粒骨混合后37℃水浴震荡90min备用.颅骨正中切口，显露大鼠顶骨及额骨，左侧顶骨正中制作5mm全层骨缺损，注意保持硬膜完整.颗粒骨及细胞混合液离心，将离心管底复合的颗粒骨及细胞植入骨缺损区，缝合切口.第1组：单纯植入颗粒骨；第2组：植入颗粒骨及MSC；第3组植入颗粒骨及成骨细胞.植入后3,...