课题3分解纤维素的微生物的分离考点要求1.能简述纤维素酶的种类及作用,2.能从土壤中分离出分解纤维素的微生物,了解这类微生物的应用
3.能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术
双基过关一、纤维素与纤维素酶1.纤维素的化学组成:三种元素,是一种糖
2.纤维素的分布:是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素
3.纤维素酶的作用:纤维素酶是一种,一般认为它至少包括三种组分,即酶、酶酶,前两种酶使纤维素分解成,第三种酶将纤维二糖分解成
二、纤维素分解菌的筛选1.筛选方法:染色法
2.筛选原理:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以为中心的透明圈,我们可以通过来筛选纤维素分解菌
三、试验设计土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案:分解纤维素的微生物的分离的试验流程、、、、1.土壤取样:采集土样时,应选择富含的环境
2.选择培养:阅读资料二“选择培养基”,回答以下三个问题:〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于培养基,原因是什么
〖思考2〗培养基选择作用机制是什么
〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是什么
(1)目的:增加纤维素分解菌的,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物
(2)制备选择培养基:参照课本旁栏中的比例配制
(3)选择培养:称取土样20g,在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在上,在一定温度下振荡培养1~2d,直至培养液变
也可重复选择培养
(4)梯度稀释:依次将培养液稀释101~107倍
思考是如何操作的
(5).将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上制备培养基:参照课本旁栏中的比例
涂布平板:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1mL涂布在平板培养基上,30℃倒置培养