槐米中芦丁和槲皮素的毛细管电泳—电化学检测VIP免费

第4期2001年12月华东师范大学学报(自然科学版)．J．．．．o．．．．u．．．．r．．．n．．．．．a．．．1．．．．．o．．．．f．．．．．．E．．．．．a．．．stChina—N—ormalUniversity(NaturalScience)No．4Dec．2001文章编号：1000—5641(2001)04—0082—06槐米中芦丁和槲皮素的毛细管电泳一电化学检测陈刚，叶建农，张剑霞(1．华东师范大学化学系，上海200062；2．复旦大学化学系，上海2o0032)摘要：用毛细管区带电泳一电化学检测法测定了中药槐米中芦丁和槲皮素的含量。研究了电极电位、电解液酸度和浓度、电泳电压及进样时间等对电泳的影响，得到了较为优化的测定条件以直径为300m的碳圆盘电极为检测电扳，电扳电位为0．90V(vs．SCE)，在100mmol／L硼酸盐缓冲液(pH9．0)中，上述两组分在10mln内完全分离。芦丁和槲皮誊浓度与电泳峰电流分别在75×10一～10×10～和50×10～～1．0×10—3moI／L范围内呈良好线性，检测下限分别为4．34×10和2．25×10mol／L。7攻测定含5．0×10～mol／L芦丁和槲皮誊的试样溶液，峰高的相对标准偏差分别为2．56％和4．11％，五次测得的平均回收事分别为9780％和96．84％。美麓词：毛细管区带电泳；电化学检测；槐米；芦丁；槲皮素中田分类号：o657文献标识码：A中药槐米是豆科植物槐SophorajaponicaL_的干燥花瞀。凉血止血，用于血热所致的各种出血症，尤宜于大肠火盛、温热郁结引起的便血、痔血等下部出血症。本品生用能降血压及改善毛细血管的脆性，近年来常用于高血压症的治疗[]，其古有芦丁和槲皮素等黄酮类生物活性物质，槲皮素是芦丁的甙元。槐米是医药工业提取芦丁的常用中药材，而芦丁是生产槲皮素的主要原料_4J。有关研究表明芦丁能维持及恢复毛细血管的正常弹性，增强其抵抗力，防止血细胞凝聚_5；槲皮素具有抗肿瘤、抗氧化及影响多种酶的活性等作用[。我国药典规定槐花和槐米中芦丁的含量分别不得少于8．0％和20．0％[1l，此外．在处方中含有槐米的中成药如槐芹合剂国内已有生产，故建立简单、快速、准确的同时测定芦丁和槲皮素的方法有一定意义。槐米中芦丁和槲皮素的测定，已有光度法L7J、脉冲极谱法[、高效液柑色谱法(HPLC)j和流动注射分析_1等。毛细管电泳(CE)具有分离效率高、分析速疲快、操作成本l『氐及试剂用量小等优点，而电化学检测(ED)灵敏度高、检测体积小。本文采用CE—ED测定槐水中芦丁和槲皮素，未见文献报道。该方法为槐米药材的真伪辨别和品质的鉴别及其制剂的质控和检验提供了一种简便的定量方法。1实验部分1．1仪器和试剂收稿日期：2000—04作者简介：陈刚(1969一)，男，讲师，博士维普资讯http://www.cqvip.com第4期陈刚，等：槐米中芦丁和槲皮素的毛细管电泳．电化学检测83毛细管电泳电化学检测系统(CE—ED)为自组装【“]，包括30kv高压电源(上海原子核研究所)，BASLC一4C安培检测器(BioanalytiealSystems，USA)，LKB(REC1型记录仪(Pharmaeia，Sweden)，加cm长焙融石英毛细管(内径25(m，外径360(m，Pdymicr0Techndogies，USA)。芦丁和槲皮素购自Aldrich公司(Milwaukee，WI，USA)，其它试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。槐米由上海市药材公司提供。1．2碳圆盘电极的制备将硬质玻璃管拉成内径约1．0mm，外径约15mm的滴管，将直径为300,um的碳棒(rotrlng，hi-Polymer，Germany)-端用直径为100m的细铜丝紧密缠绕，井热镀锡连上引出线，另一端穿人毛细管内，伸出尖端0．3-0．5cm，用透明聚氨醋树脂(双组分，上海华生化工厂)将柱端封住。使用前电极尖端用M5金相砂纸抛光，无水乙醇浸洗后再置于蒸馏水中超声清洗5rain。1．3实验方法使用自组装的CE—ED装置，电化学检测池为三电极体系：碳圆盘电极为工作电极，饱和甘汞电极(ScE)为参比电极，铂丝为辅助电极。通过三维定位调节器使工作电极与毛细管出口在一条直线上，井尽可能靠近毛细管末端。采用电动进样，条件为在12kV下从毛细管阳极端进样6s，检测池为阴极电泳槽。1．4溶液配制芦丁和槲皮素标准储备液：5．0×10一mol／L，用50mmol／L硼酸盐缓冲液(pH8．0)～乙醇(体积比50：50)混合溶液溶解配制，为黄色澄清溶液；其它不同浓度溶液用运行缓冲溶液稀释得到。...