醇溶蛋白的提取1、取一粒种子，横向切下尾部的 1/3，用剪好的称量纸包好砸碎成粉，倒入已称量好的1.5ml 离心管中，并称量面粉的质量。带胚的部分在鉴定后发芽繁殖。2、按 15μl/mg 的比例加提取液，用取直的曲别针混匀，室温（最好是 37℃）下，摇动 2h，然后 12000rpm 离心 10min，取上清液。3、分离胶：（大板 20×40cm）：80ml 凝胶液+0.8ml 甲酸+110μl 0.6%的过氧化氢，玻璃棒充分混匀，迅速倒入两玻璃板之间（10~20 分钟便会凝固）。小板：需配 40ml 即可，操作同上。4、浓缩胶：大板（20×40cm）：25ml 凝胶+40μl 0.6% H2O2，迅速混匀并灌胶插梳。5、上样：每孔 10μl 点样（10μl 提取液+10μl 上样稀释液涡旋混匀）6、电泳：150V 30min，350-400V 跑出指示剂后再持续 1-2 小时或者 150V 40min，500V 跑 4h。7、染色：过夜。8、漂洗：自来水漂洗，用毛笔抚去胶表面的杂质后拍照。提取液：70%（70ml 酒精 + 30ml ddH2O）上样稀释液：40g 蔗糖，0.5g 甲基绿（0.25g 甲基紫），定容至 100ml。 或 60 ml 甘油， 0.25g 甲基紫，定容至 100ml。促凝剂：0.6% H2O2：30% H2O2 1ml + 49ml ddH2O凝胶液： dd H2O x ml Vc 0.5 g FeSO4 0.01 g Acr 50gBis 2.5g 定容至 500ml电极缓冲液：正极 0.2%甲酸 2 ml——1000 ml 负极 0.1%甲酸 1 ml——1000 ml染色液：R250 0.5g（甲醇溶）甲醇 360ml10%TCA（三氯乙酸） 240mlDdH2O 定容至 1000ml 2 倍原液
