检测还原糖实验目的:学习检测还原糖实验原理:斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。试剂及材料:苹果,研钵及研杵,试管若干,试管架,试管夹,烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴;斐林试剂NaOH,CuSO4粉末,蒸馏水实验步骤:1.研磨苹果获得滤液待用2.配制斐林试剂:甲液:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液,乙液:质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液3取六支试管编号按下表添加试剂试管号12345葡萄糖02ml样品2ml2ml2ml斐林试剂1ml1ml1ml1ml1ml蒸馏水2ml0000葡萄糖浓度0待测0.010.11颜色变化淡蓝色-砖红色沉淀浅橙色深橙色橙色砖红色4按最接近颜色试管浓度重新配浓度梯度试管号1234葡萄糖2ml2ml2ml2ml斐林试剂1ml1ml1ml1ml蒸馏水0000葡萄糖浓度待测0.050.10.5颜色变化浅橙色浅绿茶色浅橙色5.探究:试管号12葡萄糖2ml2ml斐林试剂先加入A液,后加入B液1ml水浴温度55-60℃55‐80℃颜色变化橙色褐色实验结果:讨论:1不足之处,制备苹果匀浆时,样品过多,研磨时间过长组织中氧化酶将一部分组织氧化,影响实验结果:滴管在使用过程中造成了交叉污染,此外滴管和量筒的精度太低很难达到定量研究。2.在实验之前葡萄糖的浓度梯度没有把握好3.检测苹果中还原糖应出现的颜色变化为浅蓝色—棕色—砖红色沉淀。而本实验样品中都出现棕色,而混有葡萄糖杂质的对照组却出现了砖红色沉淀。说明组织还原糖浓度还须稀释,此外组织中被氧化的物质与生成的砖红色沉淀混合也会干扰实验结果。