1/5氯吡格雷活性代谢物在人体内的血药浓度测定(中文题目用号黑休)(空一行)房文通，罗璨，戴惠珍，孟玲（作者姓名用号楷体，如不同单位作者请用阿拉伯数字在姓名右上角标注，，）（.南京医科大学第一附属医院，江苏南京；.江苏省医药情报研究所，江苏南京）（空一行）（研究性论文摘要按“目的、方法、结果、结论、关键词”，综述类论文不需按指示式；不良反应个例报道不用摘要）[摘要]目的：采用液相色谱串联质谱（）建立人血浆中氯吡格雷活性代谢产物浓度测定的方法。方法：血浆经冷冻干燥处理，以为色谱柱；乙腈（含甲酸）水（含甲酸）为流动相，流速：·，柱温：℃，进样量：μ；通过正离子模式多反应监测扫描分析，离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物衍生物（）→，内标氯雷他定→。结果：血浆中氯吡格雷活性代谢产物衍生物在·范围内线性关系良好；最低检测限为·；提取回收率为；日内和日间精密度的均小于。结论：本方法准确可靠，简便快速且灵敏度高，适用于人血浆中氯吡格雷活性代谢物的测定，可进一步用于研究氯吡格雷活性代谢产物的药代动力学特征。[关键词]液相色谱串联质谱；氯吡格雷活性代谢物；血药浓度；药动学（小五号楷体）（空一行）（标题号粗体）（空一行）,,,（姓全大写，号）（(,,,)（空一行）:...()()·,℃μ()(→()→())..–·,·.–..,,.:;;;（空一行）（正文全文用号宋体，英文用号；文章阶梯段落用“”，“”，“”⋯⋯,整个论文行间距用单倍行距）氯吡格雷()是目前世界范围内使用最广泛的抗血小板药物，是不稳定型心绞痛和心肌梗死，以及接受经皮冠状动脉介入术患者治疗的基础用药，可以降低病死率和大幅度减少心血管事件的风险[]。药动学研究[]表明氯吡格雷本身为前体药物，经代谢转化为活性代谢物（硫醇衍生物）后才发挥抑制血小板聚集的作用。因此只有测定血液中的活性代谢药，才能真正反映其疗效。但是由于该药物的体内代谢活性物含量少且稳定性极差，普通体内药物分析方法很难达到要求，目前国内对其研究较少。本研究通过改进等[]的方法，使用冷冻干燥代替蛋白沉淀和固相萃取处理血浆样品，简单易操作、血浆用量少()、分析时间短，并运用液相色谱串联质谱（）完成对氯吡格雷活性代谢物质的提取、分离和测定。材料与方法药品与试剂氯吡格雷活性代谢产物衍生物（）标准对照品（，纯度＞，批号）；内标氯雷他定（）标准对照品（成都药检所，批号），'（）(东京化成工业株式会社，批号)，空白血浆（健康患者提供）。乙腈和甲酸为一级色谱纯，实验用水为超纯水。仪器液相色谱系统，三重四级杆质谱仪，(×，μ)色谱柱，箱式冻干机()，分析天平（上海佑科仪器仪表有限公司），涡旋混合仪（江苏新康医疗器械有限公司），低速离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）。实验条件色谱条件：色谱柱(×，μ)；流动相为乙腈（含甲酸）水（含甲酸），流速为·，柱温℃，进样μ，分析时间为，和的保留时间分别为和。洗脱条件见表。表梯度洗脱条件（表题用小五号中英文，表内容用中文号，三线表）时间流速·质谱条件：电喷雾离子源（），正离子方式检测，扫描方式为多反应监测。离子喷雾进样温度℃；离子源气体（）压力，多反应监测扫描方式定量，→（）和→（）。溶液配制.4.1标准储备液精密称取，用乙腈溶解，转至棕色容量瓶，定容，摇匀，配制为μ·的标准储备液，℃冰箱保存备用。.4.2标准储备液精密称取氯雷他定，用乙腈溶解，转至棕色容量瓶，定容，摇匀，配制为μ·的标准储备液，℃冰箱保存备用。甲酸溶液精确吸取甲酸，用乙腈或者超纯水稀释并且定容到，超声后再使用。2/5血浆样品处理1.5.1样品收集患者连续服用氯吡格雷（）后，取患者服药后的外周静脉血，于含的抗凝管中，立即加入μ·，混匀，室温反应，·离心后再·离心，然后取上清液用于测定（℃保存）。1.5.2样品制备精确吸取处理后的血浆样品μ，加入μ内标液，涡旋，转至冷冻干燥。待完全干燥后加入μ乙腈溶解，涡旋，·离心，取上清液过滤后进样。结果方法特异性取份μ的空白血浆，其中份各加入μ乙腈，涡旋，转至冷冻干燥。待完全干燥后加入μ乙腈溶解，涡旋，·离心，取上清液过滤后进样，份...
