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v1.0可编辑可修改1实验一糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应一、实验目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。二、颜色反应(一)α-萘酚反应1、原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100mL,贮于棕色瓶内。用前配制。1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL1%淀粉溶液100mL%糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、%糠醛溶液各1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。倾斜试管,小心地沿试管壁加入浓硫酸1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。观察记录各管颜色。(二)间苯二酚反应v1.0可编辑可修改21、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:%间苯二酚-盐酸溶液1000mL,称取间苯二酚0.05g溶于30mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000mL。1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各mL。再向3支试管中各加入塞氏试剂5mL,充分混合。将试管同时放入沸水浴中,。观察记录各管颜色。(二)糖类的还原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的还原性质;2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。3、了解斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理。二、实验原理还原糖是指含有自由醛基(如葡萄糖)或酮基(如果糖)的单糖和某些二糖(如乳糖和麦芽糖)。在碱性溶液中,还原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金v1.0可编辑可修改3属离子还原,而糖本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于糖的定性和定量测定。三、器材试管及试管架,水浴锅电炉四、试剂1斐林试剂甲液氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液。乙液硫酸铜的质量分数为0.05g/mL的溶液。2本尼迪克特试剂31%葡萄糖溶液100mL41%果糖溶液100mL5、1%蔗糖溶液100mL五实验操作六思考题1、斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理是什么2、试比较斐林氏、本尼迪克特试法的方法。v1.0可编辑可修改4实验二总糖的测定---蒽酮比色法一、实验目的掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。二、实验原理强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在620nm处有最大吸收。在10-100ug范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。这一方法有很高的灵敏度,糖含量在30ug左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用。一般样品少的情况下,采用这一方法比较合适。三、仪器、试剂和材料1.仪器(1)分光光度计(2)电子顶载天平(3)三角瓶:50m1X1(4)大试管:9支(5)试管架,试管夹(6)漏斗,漏斗架(7)容量瓶:50m1X2(8)刻度吸管:1m1X3,2m1X1,5mlX1(9)水浴锅2.试剂(1)葡萄糖标准液:l00ug/ml(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂:蒽酮溶于100ml浓H2SO4中当日配制使用。3.材料v1.0可编辑可修改5小麦分蘖节(或者其它材料)。四、操作步骤1.葡萄糖标准曲线的制作取7支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:管号1234567葡萄糖标准液(ml)0蒸馏水(ml)1葡萄糖含量(ug)0102030406080在每支试管中立即加入蒽酮试剂,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖玻璃球,以防蒸发。自水浴重新煮沸起,准确煮沸l0min取出,用流水冷却,室温放置10min,在620nm波长下比色。以标准葡萄糖含量(ug)作横坐标,以吸光值作纵坐标,作出标准曲线。2.植物样品中可溶性糖的提取将小麦分蘖节剪碎至2mm以下,准确称取1g,放入50m1三角瓶中,加沸水25m1,在水浴中加盖煮沸10min,冷却后过滤,滤液收集在5...

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