【创新设计】高考生物一轮复习教师用书专题一基因工程新人教版选修3最新考纲1.基因工程的诞生Ⅰ2.基因工程的原理及技术Ⅱ3.基因工程的应用Ⅱ4.蛋白质工程Ⅰ实验:DNA的粗提取与鉴定考纲解读1.基因工程的实质2.基因工程操作的四步曲及其操作实例3.基因工程在农业、医药生产、疾病诊断和治疗中的应用4.蛋白质工程的一般操作过程知识点一基因工程的概念及基本工具议一议:限制酶主要存在于原核生物中,它有什么意义?知识点二基因工程的基本操作程序想一想:什么叫基因文库?建立基因文库有什么意义?看一看:某研究小组在利用基因工程改造棉花时,发现转入的目的基因始终不表达,其原因可能是什么?知识点三基因工程的应用想一想:基因治疗是针对什么样的病进行的?知识点四蛋白质工程质粒载体质粒是细菌拟核DNA外的环状DNA小分子,可在细菌间转移。质粒是常用的转基因载体。病毒载体病毒很适合用于基因治疗。病毒的蛋白质外壳内能容纳多达7500个碱基的DNA片段。当病毒侵染宿主细胞并在细胞内增殖时,也将重组DNA带入到细胞中。病毒已经多次用于基因治疗的临床实验。这种方法存在的问题是宿主对病毒的免疫反应。显微注射法DNA可以通过显微注射法转入动物细胞中。下图所示的是目的基因的多份拷贝正通过玻璃微型吸管注射到受精卵中。转基因小鼠和家畜都是利用这种方法产生的,但是成功率很低只有2%~3%的受精卵发育成转基因动物,在这些动物中只有一小部分表达了转入的基因。基因枪法这种方法是利用压缩气体产生的动力将包裹在金属颗粒表面的外源DNA打入生物组织中。常用的金属颗粒有金粉粒子或钨粉粒子。一些细胞能像表达自身基因一样表达导入的外源DNA。学习笔记:自我校对:①DNA重组②体外DNA重组③转基因④遗传特性⑤生物类型⑥生物产品⑦限制酶(限制性核酸内切酶)⑧某种特定核苷酸序列⑨特定部位的磷酸二酯键○黏性末端⑪平末端⑫DNA连接酶⑬磷酸二酯键⑭质粒⑮小型双链环状DNA⑯限制酶⑰复制⑱遗传标记基因⑲λ噬菌体的衍生物⑳编码蛋白质○PCR技术○启动子○终止子○农杆菌转化法○显微注射法○插入了目的基因○转录出了mRNA○抗病○抗逆○生长速度○品质○药物○器官移植○蛋白质○蛋白质○氨基酸○脱氧核苷酸议一议:限制酶在原核生物中主要是切割外源DNA,使之失效,从而达到保护自己的目的。想一想:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体细菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。建立基因文库,便于随时获取目的基因。看一看:构建基因表达载体时,可能没有加入启动子。想一想:基因治疗一般针对很难用一般药物进行治疗的由基因异常引起的遗传病。,基因工程的基本操作工具1.与DNA分子相关的酶(1)几种酶的比较种类项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用特点切割目的基因及载体,能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开将双链DNA片段“”缝合起来,恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上将DNA两条链之间的氢键打开作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子(2)限制酶与DNA连接酶的关系①限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。②DNA连接酶起作用时不需要模板。2.载体(1)作用①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。(2)具备的条件①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。②有多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接。③具有特殊的标记基因,以便进行筛选。(3)种类①质粒:一种祼露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。②λ噬菌体的衍生物。③动植物病毒。提醒①一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造。②限制酶切割位点所处的位置必须是在...