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科学·技术·社会植物的组织培养-(2)VIP免费

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•掌握植物组织培养的基本过程•了解影响植物组织培养的各种因素•掌握培养基制备、外植体消毒、接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术教学目标:课题:组织培养切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成形成试管苗培养室中培养移栽脱分化脱分化再分化再分化排列疏松无规则、排列疏松无规则、高度液泡化、高度液泡化、无定形状态、无定形状态、薄壁细胞薄壁细胞一、植物的组织培养的基本过程一、植物的组织培养的基本过程whezliling离体器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽植物体原理:植物细胞的全能性二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素((11)植物材料的选择)植物材料的选择菊花胡萝卜枸杞形成层1.植物种类2.取材部位二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素((11)植物材料的选择)植物材料的选择2013.5.28晚9:00采集2013.5.29早7:00采集3.器官年龄4.保存时间((22)营养条件——)营养条件——MSMS培养基主要成分包括:培养基主要成分包括:AA、大量元素、大量元素:N:N、、PP、、SS、、KK、、CaCa、、MgMg等等BB、微量元、微量元素素:B:B、、MnMn、、CuCu、、ZnZn、、FeFe、、MoMo、、II、、CoCo等等CC、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等蔗糖等①①常用的植物激素:常用的植物激素:((33)植物激素的影响)植物激素的影响生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素、细胞分裂素和赤霉素②②生长素和细胞分裂素对实验的影响生长素和细胞分裂素对实验的影响使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素,后使用先使用生长素,后使用细胞分裂素细胞分裂素有利于细胞分裂,但细有利于细胞分裂,但细胞不分化胞不分化先使用细胞分裂素后使先使用细胞分裂素后使用生长素用生长素细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高③③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响植物细胞发育方向的影响((44))pHpH、温度、光照等、温度、光照等生长素/细胞分裂素比值结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长((55)无菌技术)无菌技术三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖制备培养基外植体消毒接种培养移栽和栽培选取外植体制备培养基选取外植体并消毒接种培养移栽和栽培三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖(二)选取外植体并消毒(二)选取外植体并消毒阅读教材P34,思考下列问题:1、什么是外植体?如何选择?2、用哪些方法对外植体消毒?3、如何避免已经消毒的外植体被再次污染?选取菊花茎段时,要取生长旺盛的;外植体消毒流程图:嫩枝嫩枝无菌水清洗3次冲洗外植体刷洗,冲洗20分钟左右无菌吸水纸吸干表面水分放入70%酒精酒精摇动2-3次6-7秒无菌水清洗并吸干表面水分放入氯化汞氯化汞溶液浸泡1~2分钟流水洗衣粉(三)接种(三)接种1.无菌技术主要包括哪几个方面?1.技术范围:(1)实验操作空间清洁和消毒操作者的手、衣着消毒(2)实验中培养器皿、接种用具和培养基等灭菌(3)实验操作过程无菌技术:防止外来杂菌的污染酒精灯火焰旁操作超净工作台(4)实验中应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触请比较以下两组图片,找出不同之处,并做分析。(三)接种(三)接种1.无菌技术主要包括哪几个方面?1432DABC

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