1.1《DNA重组技术的基本工具》专题１《基因工程》•什么叫基因工程？什么叫基因工程？基因工程又叫基因拼接技术或基因工程又叫基因拼接技术或DNADNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNADNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。的基因产物。（一）基因工程的概念（一）基因工程的概念基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程实质实质结果结果基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平人类需要的基因产物人类需要的基因产物剪切剪切→→拼接拼接→→导入导入→→表达表达基因重组基因重组•基因工程培育抗虫棉的简要过程：基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花普通棉花((无抗虫特无抗虫特性性))苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌提取提取抗虫基因抗虫基因与运载体与运载体DNADNA拼拼接接导入导入棉花细胞棉花细胞((含抗虫基含抗虫基因因))棉花植株棉花植株((有抗虫特有抗虫特性性))•上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？•基因工程培育抗虫棉的关键步骤：基因工程培育抗虫棉的关键步骤：关键步骤一：关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来细胞内提取出来关键步骤二：关键步骤二：抗虫基因与运载体抗虫基因与运载体DNADNA连连接接关键步骤三：关键步骤三：抗虫基因导入受体抗虫基因导入受体((棉花棉花))细细胞胞•解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？关键步骤一的工具：关键步骤一的工具：关键步骤二的工具：关键步骤二的工具：关键步骤三的工具：关键步骤三的工具：基因的剪刀——限制性内切酶基因的剪刀——限制性内切酶基因的针线——基因的针线——DNADNA连接酶连接酶基因的运载工具——运载体基因的运载工具——运载体1.1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”限制性核酸内切酶——“分子手术刀”限制酶是在生物体限制酶是在生物体((主要是微生物主要是微生物))内的一内的一种酶，能将外来的种酶，能将外来的DNADNA切断，由于这种切割作用是切断，由于这种切割作用是在在DNADNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。分子内部进行的，故名限制性内切酶。作用：断裂磷酸二酯键。作用：断裂磷酸二酯键。特点：即一种限制酶只能识别一种特定的核特点：即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNADNA分子。分子。产物：黏性末端、平末端产物：黏性末端、平末端（二）（二）DNADNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具大肠杆菌大肠杆菌(E.coli)(E.coli)的一种限制酶的一种限制酶能识别能识别GAATTCGAATTC序列序列，并在，并在GG和和AA之间切开。之间切开。限制酶限制酶限制限制酶酶•什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA两条单链的切两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。好互补配对，这样的切口叫黏性末端。•要想获得某个特定性状的基因必须要用限制要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？酶切几个切口？可产生几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端。要切两个切口，产生四个黏性末端。•如果把两种来源不同的如果把两种来源不同的DNADNA用同一种限制酶用同一种限制酶来切割，会怎样呢？来切割，会怎样呢？会产生相同的黏性末端，然后让两者会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的的DNADNA分子了。分子了。2.DNA2.D...
