FISH检测HER-2的意义乳腺癌有效的治疗取决于正确的选择治疗方案，肿瘤专家研究发现HER-2的水平是以阿霉素为基础药物化疗重要而独立的预后因子。HER-2水平的检测被认为是选择乳腺癌化疗的标准依据。HER-2水平的检测对乳腺癌治疗具有指导性意义。不准确的结果会造成不正确的治疗方案。导致病人遭受不必要的化疗或者使病人丧失有效的治疗良机。HER-2/neu也称作CerbB-2，在调节细胞的生长中起着重要的作用，是分子量为185kd的转膜细胞受体，属于酪氨酸酶家族的成员。HER-2被证实在乳腺癌、卵巢癌和其它肿瘤上扩增和过表达。其扩增和过表达被认为是乳腺癌最重要预后和化疗标记。大约有25%-30%乳腺癌有HER-2基因扩增。化疗是乳腺癌术后最重要的治疗方法之一，患者肿瘤HER-2扩增对以阿霉素为基础化疗的敏感性好，研究表明，HER-2扩增的病人实施强化剂量的化疗后其生存率明显提高。而对无HER-2扩增的病人没有那么好的效果。所以对无HER-2扩增的病人没有必要执行这样的化疗。准确的HER-2水平检测为正确选择治疗方案提供重要依据。目前用于治疗乳腺癌的单克隆抗体Herceptin理论上只对细胞膜上过多HER-2蛋白表达的细胞才有作用，所以Herceptin治疗需要筛选HER-2阳性的患者才有可能成功。目前检测HER-2基因扩增或HER-2蛋白过度表达的方法有许多种，有南方点墨法、西方点墨法、北方点墨法、免疫组织化学染色法（IHC）和荧光原位杂交法（fluorescenceinsituhybridization;FISH）等。目前DAKOHerceptintest，VysisPathVysionHER-2DNAProbe试剂盒和OncorINFORMHER-2/neu已通过美国食品药物管理局（FDA）的认证，目前被认为是比较可靠的方法。IHC和FISH均可以使用福尔马林固定的组织蜡块来检测，和一般病理组织标本处理相同，病理存档的组织块也能用于HER-2的检测，因此目前实验室多数使用IHC和FISH来检测HER-2。Herceptintest和FISH相比Herceptintest操作时间比较短，大约4-6个小时即可完成，而FISH需要隔夜完成。使用的设备Herceptintest只需要一般光学显微镜，FISH则需要使用荧光显微镜。从分子生物学原理上讲FISH检测的是肿瘤细胞的DNA，而Herceptintest（免疫化学法）检测的是细胞膜表面的蛋白质。实际上真正执行基因功能的物质是蛋白质而不是DNA，这要看HER-2基因是否扩增，当然以观察细胞膜表面HER-2蛋白质的量是否增加最为直接。也最为可信。因为有时即使DNA有扩增其结果未必能在蛋白质曾面表现出来。因为由DAN有表现到蛋白质被制造出来必须经过很多程序，中间可能出现很多干扰因素。除此之外，免疫化学检测法比较便宜，省时，可以较普遍的筛选。FISH的优点在于使用传统分子生物学方法检测肿瘤组织的DNA。FISH在荧光显微镜下可以确认出肿瘤所在的位置，以VysisPathVysionHER-2DNAProbe来说，它会把HER-2基因部位橘色荧光亮点，还将第17对染色体的中心颗粒（centromere）呈现绿色亮点，我们只要对比橘色和绿色亮点的数目，若橘色点/绿色点大于2，就表示有HER-2扩增，正常细胞橘色点/绿色点数目比值小于2。FISH同IHCHER-2水平检测方法相比，IHC检测的准确性不如原位杂交（CISH）和原位荧光杂交法（FISH）。就各种检测方法比较FISH为最好，FISH检测的结果可靠，被喻为HER-2水平检测的金标准。HER-2免疫组织化学+2的意思是肿瘤组织在免疫组织化学染色下着色强度为2价。多数认为HER-2+3（3价）具有临床意义，可以作为使用Herceptin治疗的依据。her-2IHC+2则必须加作FISH检测是否真的有HER-2扩增。而HER-2IHC0或+1则表示没有没有HER-2过表达，不必再作FISH，也不适合使用Herceptin治疗。FISH检测方法试剂和仪器Vysis提供的材料根据订货该盒内含有大约足够检测20，50和100人份试剂。限定一份检测22x22mm靶区。1）LSIHER2/neu黄色光谱（lowcopynumberE.colivector）/CEP17绿光谱DNA探针（E.coliplasmid）VysisP.N(productnumber):30-17060/35-171060Quantity:200uL/500uL/500uLx2forthe100assaykitStorage:-20℃inthedarkComposition(成分):SpetrumGreenfluorophore-labeledalphasatelliteDNAprobeforchromosome17,SpectrumOrangefluophore-labeledDNAprobefortheHER-2/neugenlocus,andblockingDNA,p...
