生物选修三复习:专题一基因工程一、基因工程的原理:按照人们的愿望,通过体外和,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的,因此又叫做。二、限制性核酸内切酶1、切割DNA的工具是,又称。切割产生的DNA片段末端通常有两种形式,即和。2、这类酶在生物体内能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保持细胞原有的遗传信息。三、DNA连接酶——“分子缝合针”根据DNA连接酶的来源不同,可以将它分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为。只能连接。另一类是从分离出来的,称为。既可以“缝合”双链DNA片段互补的,又可以“缝合”双链DNA片段的,但连接之间的效率比较低。四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1、基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。2、现在通常使用的载体是,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA,有的细菌中有一个,有的细菌中有多个。其他载体还有和等。3、作为载体必须具备以下条件?1.2基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取:1、目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的。2.获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因组文库:含有一种生物的基因②基因文库种类cDNA文库:含有一种生物的基因③目的基因的获取:根据基因的有关信息:基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。①PCR:是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。②条件:已知目的基因的序列。③过程:目的基因DNA受热形成,与结合,然后在______的作用下进行延伸形成DNA。④方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。二、基因表达载体的构建1、表达载体的组成:目的基因+++标记基因等。2、启动子:位于基因的,它是结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。3、终止子:位于基因的,终止。4、表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因____和发挥作用。5、标记基因:受体细胞是否含有目的基因。三、将目的基因导入受体细胞(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法1、将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法①农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对___________植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。②转化:目的基因插人进入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(3)花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种十分简便经济的方法。(我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)2.将目的基因导入动物细胞(1)方法:注射技术。(2)操作程序:目的基因表达载体→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的______________内发育→新性状动物。3.将目的基因导人微生物细胞(1)原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。(2)转化:处理细胞→细胞→表达载体与感受态细胞混合→___细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1.检测(1)方法:标记了的、抗原抗体杂交。(2)内容①检测转基因生物染色体的DNA是否插入。②检测目的基因是否转录。③检测目的基因是否翻译成。2.鉴定:鉴定、抗病鉴定等。例题1(多选题)右图为DNA分子结构示意图,对该图的正确描述是A.④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸B.解旋酶作用的部位是⑨C.某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点D.DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键反馈1如图所示,两个核酸片段在适宜条件下,经X酶的催化...