LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL生化检验项目校准泸州市人民医院LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量值之间关系的一组操作。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL仪器的性能验证：•零点漂移•波长准确度及重复性•杂散光•吸光度正确度•吸光度重复性•吸光度线性误差•交叉污染率•温度正确度•比色杯间差距检测项目校准LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL参考方法参考方法决定性方法决定性方法厂家方法厂家方法常规分析常规分析一级标准品一级标准品一级标准品一级标准品二级标准品二级标准品二级标准品二级标准品校准品校准品校准品校准品校准目的是准确度的传递校准目的是准确度的传递溯溯源源校校准准LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL项目校准主要涉及内容•校准方法的选择•校准品的选择及准备•校准频率的选择•校准后的验证•问题讨论LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL校准方法的选择LUZHOUPEOPLE’SHOSPITALK因子法（+-）：理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试剂生产厂家给出的k值都属于。实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K值校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳定性等通过校准品校准后得到的K值。K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点终点法，两点速率法，多点速率法。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL线性校准（Linear）：其反应为线性（直线），一般只需一个校准品进行校准。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL非线性法：又称非直线性校准法非线性法包括logit-log法、指数函数法、样条函数法等方法Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜率，a表示近似常数。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITALlogit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL•logit-logXp与样条函数法•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。•曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL校准品的选择及准备校准品：含有已知量的欲测物，用以校准该测定方法的数值，它与该方法、试剂、仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统性误差。最好为人血清基质，减少基质效应仪器、试剂、校准品的配套性如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质要有明确的不确定度LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化，温和混匀。冻干产品的复溶步骤：从冰箱中取出样本，置室温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温下使之完全溶解，温和混匀。应按厂家提供说明书操作。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL校准品浓度水平及个数选择•校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。•校准范围也定义为分析方法的工作范围。•个数要与仪器要求相匹配LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL案例分析一、现象：某品牌HCY试剂（仪器：雅培C8000），校准无法通过，出现“校准失败”的报警。试剂参数为：Primarywavelength：340nm；Secondarywavelength：700nm；Mainreadtime：31-33；Blankreadtime：26-28；Samplevolume：10ul；R1reagentvolume：185ul；R2reagentvolume：50ul；Calibrationmethod：Spline；校准品个数设置：3；浓度分别设置为：0、10、33umol/L。LUZHOUPEOPLE’SHOSPITAL二、了解情况：查看校准结果，发现其每个浓度的吸光度实际在该仪器上已做出测定，分别为：0：-0.002710：-0.034433：-0.0738，但参与最终结果计算的CalFactor（校准因数）却显示为0，说明该仪器并...
