羟基蛋氨酸铁(铜、锰、锌)螯合率的测定 长沙兴嘉生物工程有限公司质检中心氨基酸微量元素螯合物的生物利用率比无机离子的利用率高 2~3 倍，使用氨基酸微量元素螯合物是解决过量添加无机盐造成环境污染这一难题的有效方法，同时也防止了无机盐产生的不良影响及对维生素的拮抗作用。但氨基酸微量元素螯合物在饲料生产中应用还比较滞后，其原因除了价格因素外，缺乏合适的质量检测方法，也是推广应用的一个重要障碍，目前在产品标签保证值中大多仅明示矿物元素和氨基酸的百分含量，用户无法客观地评价螯合物产品质量。本研究旨在为羟基蛋氨基酸螯合物的质量检验提供一种简便实用的方法。1 原理试样经加热溶解、离心分离，分成沉淀态螯合元素、可溶性螯合元素及游离态金属离子。可溶性螯合元素及游离态金属离子经过凝胶色谱，在规定条件下洗脱，实现可溶性螯合态金属元素和游离态金属离子的分离，从而可分别测得螯合态金属元素和游离态金属离子的含量，分别用原子吸收光谱法测定沉淀态螯合元素、可溶性螯合元素及游离态金属离子的含量，即可计算出相应的氨基酸螯合物的螯合率。2 试剂和材料实验用水应符合 GB6682 中三级用水的规格，使用试剂除特殊规定外，均为分析纯。2.1 克拉克—鲁布斯（Clark—lubs）缓冲溶液的配制 2.1.1 pH7.0 的克拉克—鲁布斯（Clark—lubs）缓冲液的配制 分别量取 1.0mL 氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL 硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL 氯化钾(0.4mol/L)溶液，注入 100mL 容量瓶，稀释至刻度。2.1.2 pH9.0 的克拉克—鲁布斯（Clark—lubs）缓冲液 分别量取 20.8mL 氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL 硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL 氯化钾(0.4mol/L)溶液，注入 100mL 容量瓶，稀释至刻度。 2.1.3 pH10.0 的克拉克—鲁布斯（Clark—lubs）缓冲液 分别量取 43.7mL 氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL 硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL 氯化钾(0.4mol/L)溶液，注入 100mL 容量瓶，稀释至刻度。 2.2 乙二胺四乙酸二钠溶液[C(EDTA)=0.1mol/L]。 称取 37.2g 乙二胺四乙酸二钠加热溶于 100mL 水中。 2.3 葡聚糖凝胶（G-15） 2.4 盐酸（1+10）3 仪器 3.1 恒温水浴锅 30~80℃可调 3.2 原子吸收分光光度计 波长范围 190~900nm 3.3 离心机 转速能达到 3000r/min。 3.4 色谱柱 300×9mm4 测定步骤 4.1 试样预处理称取试样约 0.5g，精确到 0.0002g，置于 25mL 离心管中，加入 15mL ...
