—G↓GATC C— —C CTAG↑G— 用酶Ⅰ切割 —G GATCC— —CCTAG G— 1.（苏北四市 2009 届高三第三次调研考试）33．（7 分）2008 年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助 GFP 发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有 1 个酶Ⅱ的切点。① 请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 。② 在 DNA 连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，理由是： 。（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是___ ____。（3）如果将切取的 GFP 基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP 基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免 。（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。① 推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。33．(7 分)（1）①② 可以连接 因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）（2）显微注射技术（3）为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因 发生免疫排斥反应（4）②①③④2.（南通、扬州、泰州三市 2009 届高三第一次调研考试）31.（9 分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条 72 个碱基的 DNA 单链，两条链通过 18 个碱基对形成部分双链 DNA 片段，再利用 Klenow 酶补平，获得双链 DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：（1）Kle...
