石蜡包埋的基本步骤和注意事项第一部分石蜡包埋的基本步骤一、 脱 水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分,为下一步透明及浸蜡创造条件。 此外,脱水还可以使组织再次发生一定的硬化,脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。一.常用的脱水剂1.酒精:是制片最常用的试剂,可与水在任何比例下相混合,酒精的脱水能力比较强,又能硬化组织。 但是酒精的船头速度很快, 对于组织会有明显的收缩作用。因此在以酒精作为脱水剂时,应该先从浓度较低的酒精开始,然后递增其浓度,这样可以避免组织过度收缩。第一瓶酒精浓度随固定剂, 脱水组织的大小和种类而异, 经水溶性固定剂固定的细柔组织需要慢慢脱水, 从 50%酒精开始。 如眼球,组胚组织等大多数组织标本则是从 70%酒精开始,再经80%, 95%以至无水酒精。但是有时为了某种特殊要求,例如要做糖元的切片标本或是要做尿酸结晶染色切片标本,为了防止糖元和尿酸结晶在水中消失却要直接投入无水酒精中固定,而不需要经过水洗和低浓度酒精的脱水过程。 经无水酒精固定后的组织只需要再经过换一次无水酒精脱水即可。用 AAF 固定液固定的组织可直接置于95%酒精开始脱水。用醇性固定剂(如Carnoy)则可置于高浓度无水酒精内,但应多次换液以除酸。一般情况下,组织经过70%,80%,90%,95%,以至无水酒精的脱水程序,即可达到脱水的要求。 但是为了能使大量的组织块同时进行脱水,则要求保持液体的浓度以保证脱水的作用, 最好是以两次 95%酒精,两次 100%酒精重复进行脱水,以保证组织的水分脱净。脱水时间应视组织种类,组织块大小,厚薄和固定剂的不同而异。 如脱钙的骨组织, 实质性脏器等的脱水过程宜短,而疏松结缔组织,脂肪组织等,脱水过程则宜适当延长。水分必须脱干净,脂肪必须溶去。含有铬酸的固定剂固定的组织, 脱水时间不宜过长, 而镀银组织更应注意, 脱水时间应比为镀银的同类组织要短。脱水的基本原则: 从低浓度酒精开始逐渐升到高浓度酒精,以保持组织中的水分完全脱净。一般1cmX1cmX0.2cm 大小的组织 ,脱水全过程仅需要数小时即可达到完全脱水。在各级浓度酒精内处理的最短时间分别减少到2— 4 小时也能获得满意的结果。 如果组织脱水不尽 ,随后的透明 ,浸蜡都会受到影响 ,致使切片很难以完成。较差质量的切片 ,很容易造成在染色时脱片 ,这样的组织蜡块,因其含有一定的水分 ,一经与空气接触即干燥而凹陷。脱水不尽的组织...