胶体金免疫分析技术详解 随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业,免疫分析正在向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前只能在医疗及检测中心应用,虽也能较快速给出结果,但仍需一定时间,不适合远离医疗及检测中心的地区,更不能用于“患者床旁检验”和普查的需要,在酶免疫分析的基础上,主要以硝酸纤维素膜为载体的快速诊断方法迅速和广泛地发展起来。这类方法目前在文献及市场上的命名还很不统一。它实际上属于快速斑点免疫结合分析,主要有以下两种方法:斑点免疫渗滤分析DIFA 和斑点免疫层析分析DICA。本篇主要介绍以金作为标志物的胶体金免疫分析技术。 金标记免疫分析技术也称免疫胶体金技术,是于1971 年建立 的一种信 号 显 示 技术。此 技术最初 用于免疫电 镜 检查,由 胶体金颗 粒 标记抗 原 或 抗 体,与组 织 或 细 胞 中相 应的抗 体或 抗 原 相 结合,在电 子 显 微 镜 的检查时可 起特 异 的示 踪 作用。此 后 ,此 技术与银 染 技术相 结合建立 的免疫金银 染 色法,使 抗 原 抗 体特 异 反 应信 号 可 在光 学 显 微 镜 下观 察 。近10 多 年来,利 用硝酸纤维素膜( NC) 等为固 相 载体,以胶体金标记的抗 原 或 抗 体与特 异 配体的反 应在膜上进 行 ,建立 了 快速的金标记免疫渗滤技术和金标记免疫层析技术,并 在传 染 病 、 心血 管 病 、 风 湿 病 、 自身 免疫病 的免疫学 检测中广泛应用。 胶体金是指 金微 小 粒 子 ( 0-100nm) 分散 在另一种物质 中所 形 成 的体系 ,通 常 指 金以微 小 粒 子分散 在溶 液 中所 形 成 的金溶 胶,用此 金溶 胶标记蛋 白 质 ( 抗 原 、 抗 体或 SPA、 SPG),胶体金颗 粒 具有高 电 子 密 度 的特 性 ,故 在金标蛋 白 的抗 原 抗 体结合处 ,显 微 镜 下可 见 黑 褐 色 颗 粒 ;当 这些 标记物在相 应的标记处 大 量 聚 集 时,可 在载体膜上呈 现 红 色 或 粉 红 色 斑点,从 而 用于抗 原 或 抗 体物质 的半定量 或 定性 。 与ELISA 不同 之 处 便 是反 应时间大 大 缩 短 ,仅 需要数 分钟 就 完 成 了 E...