中华人民共和国国家标准 消毒与灭菌效果的评价方法与标准 GB15981-1995 Evaluating method and standard for the efficacy of disinfection and sterilization 第一篇 压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准 1 主题内容与适用范围 本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法 本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。 2 试剂 本标准所用试剂，凡未说明规格者，均为分析纯(AR)，水为蒸馏水。 2.1 蛋白胨。 2.2 葡萄糖。 2.3 溴甲酚紫酒精溶液：取溴甲酚紫2.0g，溶于100mL95%乙醇中。 2.4 溴甲酚紫蛋白胨水培养基配制：蛋白胨10.0g，葡萄糖5.0g，溶于1000mL蒸馏水中，调pH 值至7.0～7.2，然后再加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6mL，摇匀后，按5mL/管，分装包口，置压力蒸汽灭菌器中，于115℃灭菌40min 后备用。 3 指示菌 嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC 7953 或SSI K31)菌片，含菌量为5×105～5×106cfu/片，121℃下，杀灭90%微生物所需时间 D121 值为1.3～1.9min，杀灭时间(KT 值)为≤19min，存活时间(ST 值)为≥3.9min。 4 化学指示剂 需用卫生部批准的化学指示剂。 5 技术要求 压力蒸汽灭菌器 压力，MPa/cm2 温度，℃ 灭菌时间，min 下排气式 0.070 115 40 0.105 121 30 预真空式 0.210 134 4-6 6 检测方法 6.1 生物学指标(用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据)。 6.1.1 将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。 6.1.2 灭菌柜室内，上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣，4 块小手术巾，2 块中手术巾，1 块大手术巾，30 块10cm×10cm、8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm 大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm×13cm×6cm)代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 6.1.3 经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，56℃培养48h，观察培养基颜色变化。 6.2 化学指标 在物品包外用化学指示胶带，可作为物品是否经过灭菌的处理 标志 。在物品包内中心部位用化学指示剂，可作为物品是否灭菌的参 考 标志 。 7 结 果 判 定 及 评 价 7.1 同 次 检 测 中 ， 标 准 试 验 包 或 通 气 贮 ...
