word 1 / 9 实 验 报 告实验课程:小麦萌发前后淀粉酶活性的比拟学生某某:xxx 学号:xxx 专业班级:xxx word 2 / 9 2017 年 4 月 25 日实验背景 : 淀粉是植物最主要的储藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的根本原料。 淀粉经淀粉酶作用生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用。 淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。按照其水解淀粉的作用方式,可以分成α- 淀粉酶、β - 淀粉酶等。实验证明,在小麦、大麦、黑麦的休眠种子中只含有β-淀粉酶,α- 淀粉酶是在发芽过程中形成的,所以在禾谷类萌发淀粉酶的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。其活性随萌发时间的延长而增高。 本实验以淀粉酶催化淀粉生成复原的性糖的速度来测定酶的活力,淀粉水解成复原性糖,复原性糖能使3,5word 3 / 9 —二硝基水杨酸复原成棕色的3- 氨基, 5- 硝基水杨酸。可用分光光度计法测定。一、 实验目的1、学习分光光度法测定酶活力的原理与方法;2、了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。二、 实验原理淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。实验证明, 在某些植物如小麦、大麦的休眠种子中只含有β-淀粉酶,α-淀粉酶是在发芽过程中形成的, 所以在禾谷类萌发的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。其活性随萌发时间的延长而增高。本实验以淀粉酶催化淀粉生成麦芽糖的速度来测定酶的活力。麦芽糖是复原性糖,能使3,5-二硝基水杨酸复原成棕色的3-氨基5-硝基水杨酸,后者在500 nm 处有最大吸光度,而进展定量测定。三、 实验仪器和试剂1、实验仪器:①紫外 - 可见分光光度计;②离心机;③研钵. 2、实验试剂①小麦种子 〔萌发种子 10 粒、干种子 10 粒〕;②1%氯化钠溶液;word 4 / 9 ③标准麦芽糖溶液; ④3,5--二硝基水杨酸溶液; ⑤0.02 mol/L 磷酸缓冲液 .⑥0.2%淀粉溶液 .. 四、 实验步骤1.麦芽糖标准曲线制作取 7 支具塞刻度试管,编号,按表1 参加试剂:表 1 制作麦芽糖标准曲线配方表充分摇匀,置于沸水浴中煮沸5 min 。取出后流水冷却,加蒸馏水定容至20 m L 。以 1 号管作为空白调零点, 在 500 nm 波长下比色测定。以麦芽糖含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。2、小麦萌发前后的酶液提取〔1〕幼苗酶的提取:取萌发的幼苗10 株入研钵,加 1 % NaCl 3 word 5 / 9 ml,研磨成匀浆, 0-4 ° C 下放置 20 min。 离心, 2000 r...