培养基配方及配制方法VIP免费

培养基配方 1 斜面菌种保存培养基 1.1PDA 培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基） 称取200g 马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml 煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g 葡萄糖和15-20g 琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20 分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。 1.2 麦芽汁琼脂培养基 麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的 3~4 倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡 1 小时，然后缓缓加温至 55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温 4~6 小时（用 0.02 摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。在糖化过程中，应每小时搅拌一次。取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20 分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。 2 基菌落总数检测 2.1 平板计数琼脂培养基 将 胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g 加入蒸馏水1000ml 中，煮沸溶解后，调pH，然后在 121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。 3 志 贺 氏 菌检测 3.1 GN 增菌液 成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。pH7.0 制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH 为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。 3.2 HE 琼脂 成分：胨：12g，牛肉膏 3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素 2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂 18~ 20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade 指示剂 20ml.，甲液20ml，乙液20ml。pH7.5 制法：将上述前七种成分加入400ml 蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到 600ml 蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至 50~ 55℃，倾注浇平板。 注 1：此培养基不能高温灭菌。 注 2：甲液的配置： 硫代硫酸钠：34g，柠檬酸铁钠：4g，蒸馏水：100ml。 注 3：乙液的配置： 去氧胆酸钠：10g，蒸馏水：100ml。 注 4：Andrade 指示剂的配置： 酸性复红：0.5g，1mol/l 的氢氧化钠溶液：16ml，蒸馏水：100ml。 将酸性复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液1~ 2ml。 3.3 SS 琼脂...