土壤中放线菌的分离与纯化 实验目的 1 掌握放线菌的生长特性，微生物的培养方法。 2 掌握微生物实验的基本生物技术，主要包括无菌操作技术，纯种分离技术，纯种培养技术，以及抗生素检测等。 3 掌握合成培养基，选择培养基的制备方法。 4 学习对微生物实验的中出现问题的分析，解决方法 实验材料 药品：可溶性淀粉、KNO3、NaCl、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、琼 脂 、重 铬 酸 钾 其 他 ：高 压 蒸 汽 灭 菌锅 、扭 力 天 平 、药匙 、烧 杯 、量 筒 、玻 璃 棒 、三 角 瓶 、试 管 、牛 皮 纸 、硫 酸 纸 、线绳 、无菌培养皿 、铁 锹 、小 铲 、酒 精 棉 球 、镊 子 、玻 璃 铅 笔 。 实验原理 放线菌是 重 要的抗生素产 生菌，主要分布 在 土壤中（ 主要是 链 霉菌），其 数量 仅次于细菌。一般在 中性偏碱性、有机质丰富、通气性好的土壤中含量 较多。由于土壤中的微生物是 各种不同种类微生物的混合体，为了研究某 种微生物，就 必 须 把 它 们 从 这 些 混杂 的微生物群体中分离出来 ，从 而 获 得 某 一菌株 的纯培养。分离放线菌常 用 稀 释 倒 平板法。根据放线菌的营养、酸碱度等条件要求，常选用合成培养基或有机氮培养基。如果培养基成分改变，或土壤预先处理（120℃热处理1h），或加入某种抑制剂（如加数滴 10%酚等），都可以使细菌，霉菌出现的数量大大减少，从而淘汰了其它杂菌。再通过稀释法，使放线菌在固体培养基上形成单独菌落，并可得到纯菌株。 放线菌可以产生抗生素，抑制其他菌种的生长，故可用金黄色葡萄球菌（G+）和大肠杆菌（G-）作指示菌鉴别放线菌。 高氏一号合成培养基是培养放线菌的培养基。这种培养基是采用化学成分完全了解的纯试剂配制而成的培养基，高氏一号培养基：碳源为可溶性淀粉、氮源为KNO3 、NaCl 、K2HPO4•3H2O 、MgSO4•7H2O 作为无机盐，FeSO4•7H2O 作为微生物的微量元素，提供铁离子等组成 1 .高氏一号合成培养基的制备 K2HPO4 •3H2O 0.125g，可溶性淀粉5g，硝酸钾0.25, MgSO4•7H2O0.125g， FeSO4•7H2O 0.025g，氯化钠0.125g，琼脂5g，水250ml。 配制时，先依次 加入上述 药 品 （除 琼脂外 ）顺 序 溶解，加入无菌水至 250ml，调 节 pH＝ 7.4，再加入琼脂不 断 搅 拌 震 荡 至 溶化后 ， 121℃灭 菌20 分钟 。 将 6 套 平...
