常用缓冲液及培养基配方 LB 液体培养基: Bacto-蛋白胨 10g 酵母抽提物 5g 氯化钠 10g 加950ml 蒸馏水溶解,用5N 氢氧化钠调pH 至7
0,定容至1000ml,高压灭菌后保存
LB 固体培养基: 每升LB 液体培养基中加入12g 琼脂粉,高压灭菌后保存
SOB液体培养基 Bacto-蛋白胨 20g 酵母抽提物 5g NaCl 0
5g 加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7
0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2
SOC液体培养基 SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L
麦康凯固体培养基 每1000ml 水中加52g 培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌
NA 固体培养基 牛肉浸膏 3g 酵母浸膏 1g 蛋白胨 蔗糖 琼脂粉 5g 10g 15g 加950ml 蒸馏水溶解,调pH 至7
0,定容至1000ml,高压灭菌后保存
TB 培养基 : 将下列组分溶解在0
9L 水中: Bacto-蛋白胨 12g 酵母抽提物 24g 甘油 4ml 各组分溶解后高压灭菌
冷却到60℃,再加100ml 灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0
72 mol/L K2HPO4 的溶液
高压灭菌或用0
22u m 的滤膜过滤除菌
溶液Ⅰ 葡萄糖 2
25 g 50mmol/L 1mol/L Tris·Cl(pH8
25ml 20mmol/L 0
5mol/L EDTA(pH8
0) 5ml 10mmol/L 调pH至8
0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存
溶液Ⅱ 10 mol/L NaOH 2ml 10% SDS 10ml 用水定容至100 ml,现配现用
溶液Ⅲ 5 mol/L 醋酸钾 60ml 冰醋