常用缓冲液及培养基配方 LB 液体培养基: Bacto-蛋白胨 10g 酵母抽提物 5g 氯化钠 10g 加950ml 蒸馏水溶解,用5N 氢氧化钠调pH 至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。 LB 固体培养基: 每升LB 液体培养基中加入12g 琼脂粉,高压灭菌后保存。 SOB液体培养基 Bacto-蛋白胨 20g 酵母抽提物 5g NaCl 0.5g 加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。 SOC液体培养基 SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。 麦康凯固体培养基 每1000ml 水中加52g 培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。 NA 固体培养基 牛肉浸膏 3g 酵母浸膏 1g 蛋白胨 蔗糖 琼脂粉 5g 10g 15g 加950ml 蒸馏水溶解,调pH 至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。 TB 培养基 : 将下列组分溶解在0.9L 水中: Bacto-蛋白胨 12g 酵母抽提物 24g 甘油 4ml 各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml 灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4 的溶液。高压灭菌或用0.22u m 的滤膜过滤除菌。 溶液Ⅰ 葡萄糖 2.25 g 50mmol/L 1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L 调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。 溶液Ⅱ 10 mol/L NaOH 2ml 10% SDS 10ml 用水定容至100 ml,现配现用。 溶液Ⅲ 5 mol/L 醋酸钾 60ml 冰醋酸 11.5ml 水 28.5ml 高压灭菌后保存。 高盐TE 缓冲液 10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0* 0.1mmol/L EDTA, pH 8.0* 1mol/L NaCl 于室温保存(可在几年内保持稳定) CTAB 抽提液 2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵) 100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 * 1.4mol/L NaCl 于室温保存(可在几年内保持稳定) CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl) 在80ml H2O 中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10 一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。如果需要,可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml. CTAB 沉淀液 1%(w/v) CTAB 50mmol/L Tris.Cl, pH 8.0 10mmol/L EDTA, pH8.0 PBS 缓冲液: 十二水磷酸氢二钠 15g 磷酸二氢钾 1g 氯化钠 40g 氯化钾 1g 定容至5000ml, 调pH 至7.2。 ELISA 包被液: 碳酸钠 1.59g 碳酸氢钠 2.93g 定容至1000ml,调pH 至9.6。 ELISA...