细胞化学染色检验前言 细胞化学是细胞和化学相结合的一门科学
细胞化学染色是根据化学反应的原理,应用涂片染色的方法,观察细胞的化学成分及其变化的重要方法
在病理情况下,血细胞的化学成分可发生改变
因此,细胞化学染色不仅对研究血细胞的代谢活动、生理功能,而且对生理和病理情况下血细胞的化学成分的变化、各种类型血细胞的鉴别、某些血液病的鉴别诊断、疾病的疗效观察以及发病机制的探讨均有重要意义
研究血细胞的化学物质较多,如各种酶类、脂类、糖元、铁等
下面主要介绍血液学中常用的一些细胞化学染色方法
瑞氏染色法: 瑞氏染色液的配制: 瑞氏染料(粉)1g 纯甲醇 60ml 将染料放在乳钵内加少量甲醇研磨使染料溶解,然后将已溶解得倒入洁净的玻璃瓶内,剩下未溶解的再加少量甲醇研磨,如此继续操作,直到全部染料溶解及用完甲醇为止
制配好的染液保存于温室中一周便可应用
新鲜配制的染液偏碱性,放置后可呈酸性,染液储存愈久染色愈好
缓冲液的配制及其作用: 1% KH2PO4 (即 1g KH2PO4+100ml 蒸馏水) 30ml 1% Na2HPO4 20ml 加蒸馏水至 1000ml PH 6
8 过氧化物酶染色 一、原理: 细胞中的过氧化物酶(POX)分解底物过氧化氢(H2O2)产生新生态氧,后者使联苯胺氧化为联苯胺蓝沉淀而定位于POX活性部位
二、过氧化物酶染色法染液的配制: (1)联苯胺(Benzidine) 0
3g 95%乙醇(Ethye alcohol) 99ml 36%亚硝基铁氰化钠(Sodium Nitroprusside) 1ml (0
36g+1ml 蒸馏水,置于37℃水浴箱中促溶
) (2)30%mlml 过氧化氢溶液: 30%双氧水,吸取一滴约 0
05ml 放入 50ml 蒸馏水内,每次用时必须新鲜配制
三、结果判断: 细胞质中有蓝色颗粒的为阳性细胞