细胞培养实验写报告内容VIP专享VIP免费

细胞培养实验写报告内容 1 目的 2 原理 3 材料与方法（操作步骤） 4 实验结果 5 结论或结果分析 实验一 鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养 实验二 滤泡性口炎病毒（VSV）的增殖（纯培养） 实验三 Hep-2 细胞的传代培养 实验四 VSV TCID50滴定 实验五 干扰素活性（效价）的测定 实验六 VSV 中和试验（稀释血清固定病毒法） 实验二 鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养 一、目的 1 、掌握鸡胚原代成纤维细胞的制备及培养的基本步骤； 2 、掌握活细胞的显微镜下观察； 3 熟悉病毒在细胞内增殖的基本判断方法。 二、原理 离体动物组织通过温和的手段（机械和酶消化）形成单个细胞后，在适宜的外界环境中，包括温度、酸碱度和气相环境，并给予充足合适的营养条件，能生存、生长形成单层细胞，这种原代培养的细胞具有原来体内所具备的基本特性，比如肌肉细胞的收缩功能；上皮细胞的分泌功能等。通常把这种从体内取出组织细胞开始培养到第一次进行传代之前的这一段时期称为原(初)代培养。原代细胞最接近体内细胞的特性，因而对外界环境的变化也最敏感，因此比较适合病毒的增殖，药物的作用机制等的研究。 三、材料（按 2 人/组的量发放） 名 称 数 量 备 注 9～11 日龄鸡胚 1 只 无菌器械 1 套 无菌无毒平皿 2 只 5 或 10ml 吸管 4 支 1 或 5ml 吸管 1 支 青霉素瓶（带塞） 2 只 Hank s’ 液 250ml 1640 RMPI 或 DMEM 500ml 双抗 5ml 胰蛋白酶 1ml 小牛血清 5ml 5.6% NaHCO3 3ml 碘酒和酒精棉球 若干 细胞培养瓶 2 只 四、操作步骤 1、在 DMEM 和 Hank’s 液中分别无菌操作以 1％的量加入双抗，吸出 10～15mlHank’s 液至无菌平皿中备用； 2、碘酒和酒精棉球分别拭擦鸡胚气室外卵壳； 3、取出两只无菌平皿，并标记①和②，待用。 4、大镊子轻敲卵壳顶部然后小心去掉气室外卵壳； 5、消毒镊子后小心撕破卵膜，两人互相配合取出鸡胚置于盛有 Hank’s 液的平皿①中，小心去头、内脏、爪和粘液及血球，洗涤后置于盛有 Hank’s 液的平皿②中，再充分洗涤； 6、取出洗净的组织块置于大青霉素瓶中，在火焰附近用无菌眼科剪刀将其剪成约0.5～1mm3 的小块（约250 次），此时体积约0.5ml；用 Hank s’ 液洗涤两次。 7、按照10 倍量加入 0.25％胰蛋白酶，调节pH 至约7.3～8.0（肉眼观为肉红色）盖上瓶塞，写好标记； 8、将上述细胞瓶置于 37℃...