实验题目：细胞传代 实验材料：细胞培养箱，安全柜，手套，酒精灯，吸管，移液管（5ml，10ml），50mL 离心管，培养瓶（25cm2），移液枪，离心机，计时器，真空泵，抽滤瓶，水浴锅，记号笔，冰箱 实验原理： 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法
同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程
实验步骤：以 Hela 细胞为例说明具体实验操作步骤 一．实验前准备工作： 进细胞室先换拖鞋，带上手套 75%的酒精进行表面消毒； 检查酒精灯有无95%酒精，电枪有无电； 将实验过程中用到的实验器材（包括培养瓶、50mL 离心管、移液管）放于安全柜里，实验前安全柜开紫外照15~20min； 将细胞培养液放于37℃水浴中预热； 抽滤瓶与真空泵相连，废弃缸套袋
准备实验： 先关闭紫外等 30min 后再进行实验； 75%酒精喷于纸上，将超净工作台仔细擦试干净； 点燃酒精灯，小心的将细胞从孵箱中拿出
1．吸除旧的 DMEM 培养液： 拿出吸管（要拿吸管的上端），插入与抽滤瓶相连的橡胶管中，在酒精灯外焰灼烧灭菌，细胞培养瓶倾斜将吸管插入瓶底部一角，吸出旧的 DMEM 培养液，将用后的吸管弃于废弃缸里
注意：一定要吸除干净，否则消化时间过长，细胞损伤过大
2．消化： 拿出 5mL 移液管，插入电枪中，酒精灯过火灼烧，吸取 2mL 0
25%胰酶加入培养瓶中，混匀，放于37℃孵箱中消化 5-6min
取下用后的移液管
3．中和： 从孵箱中拿出培养瓶，显微镜下观察细胞是否被完全消化下来，5mL 灭菌后移液管加入 3mL DMEM 培养液终止消化
反复吹打混匀；吸出中和液转移到50mL 离心管中
4．离心收集细胞： 配平后离心200×g，3min
将新的DMEM 培养
