外周血骨髓染色体教材VIP免费

LOGO外周血、骨髓染色体培养和制片中的注意事项第一篇：细胞遗传学的基本知识：引言：细胞遗传学的形成和发展：1910年澳地利学者摩尔根在果蝇中发现了性锁遗传规律；1925年他又发表了《基因论》；1955年，美籍华人徐道觉首先发现了哺乳动物细胞低渗染色体制备法，为医学遗传学的发展奠定了基础；1970年，卡斯伯森发现了人类染色体的分带技术。基本知识1：一、细胞遗传学时期：该时期大致是在1910—1940年，这一时期通过对遗传学规律和染色体行为的研究，确立了遗传的染色体学说。二、什么是染色体的行为：它是指在细胞周期中，染色体在形态和结构方面所表现出的一糸列有规律性的变化。这种变化对于生物的遗传和变异，起着很重要的作用。基本知识2：3、染色体是细胞核内满载遗传信息编码的重要物质，它是由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量的RNA所组成的一种核蛋白复合体。从DNA到染色体要经过四级结构的构型变化，它们分别是：核小体、螺线体、超螺线体和染色体。基本知识3：•染色体组型：•即根据每种生物染色体的数目、大小和形态等特征，借助显微照相技术，将单个细胞内的同源染色体剪下、依次配对和分组排列，这就构成了该个体的染色体组型或核型。由于细胞在有丝分裂的中期，其染色体的形态最为典型，故此，通常把细胞分裂的中期，作为识别染色体的个体性和研究染色体组型的最佳时期。基本知识4：•染色体带型：•染色体经过一定程序的处理并用特定的染料染色之后，在普通在光镜或荧光镜下，染色体可显示出不同深浅颜色的条纹或不同强度的荧光区带，这种区带就称之为染色体带。染色体上染色体带的形态表现，就称之为染色体带型。这种显示染色体带的过程，就称之为染色体显带。第二篇：培养过程中的注意事项注意事项（一）：•器皿的清洗是整个实验的关键性的第一步•1、玻璃器皿的清洗•新的玻璃器皿先用清水冲干净，再在清洁剂（如洗衣粉、洗洁•精等）溶液中，用毛刷彻底刷干净，然后清水冲净。晾干。再用5-10%HCL（浓HCL原液浓度约36%）泡过夜后，冲净烘干，再泡入清洗液中24小时（注意泡入的器皿内不能有气泡），再用清水彻底冲净，然后用蒸馏水冲净（普通器皿冲五遍），用作细胞培养的器（如•培养瓶等）蒸馏水冲净后，再用三蒸水冲两遍以上，烘干。用纯棉布或无毒的硬纸包裹，高压高温灭菌备用。旧的玻璃仪器的清洗，可免去中间用5-10%HCL浸泡过夜这一步骤，其余的处理方法仍要保留。2：载玻片的清洗处理把玻片逐片用皂粉液洗刷干净（用粗纱布刷，不要用毛刷），然后用自来水彻底冲净后，晾干。逐片放入清洗液中浸泡24小时，取出后用自来水彻底冲净，泡蒸馏水一天，取出放入盛有80%乙醇的容器。（带密封盖）内保存备用*玻片的清洁直接影响染色体铺展、形态及背景的清晰；玻片之间粘在一起时，密封程度高，皂液和清洗液无法浸入，故要逐片浸入。注意事项（二）•细胞培养中的有关知识全血中含有红、白细胞二类，它们均是处于未分裂的间期细胞。红细胞没有核无分裂能力；白细胞虽有细胞核存在，但是在外周血中已处于休止期，因此要使白细胞从间期进入分裂期必须加刺激药物现在。最常用的促使分裂的药品是PHA，它能使白细胞中的淋巴细胞和单核细胞转化为具有分裂作用的母细胞，染色体只有在细胞分裂时才能出现具有一定的形态，这样才便于我们识别。此外，染色体的形态在细胞分裂中期时最典型的，所以在培养过程中还需用秋水仙素类药物，这种药物可以破坏细胞分裂过程中纺锤丝的形成，使细胞分裂停止于中期，由于秋水仙素的作用破坏了纺锤丝的形成，造成了染色体着丝粒不能分开，但染色体的两臂却在S期时已复制了，这就构成了染色体的形态为“X”形或“∧”形，称之为中期染色体图形。为了便于观察和计数，因而在制作过程中还需采用低渗处理，低渗处理的目的在于使细胞膨胀，细胞膜破裂，染色体分散，这样可便于分析一、培养中应注意的问题1：•1、标本中的抗凝剂:•标本中的抗凝剂常采用的是肝素，肝素是一种多•糖，能阻止白细胞和淋巴细胞与红细胞集结在一起而•影响培养的质量，但肝素浓度太高会导致溶血，同时也•可抑制淋巴细胞的转化。一般剂量是100单位肝素液•可抗凝5...