2011春季学期春季学期电泳分析血清蛋白电泳血清免疫固定电泳何肖娟hxj50701@163.com南方医科大学生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心电泳技术电泳：溶液中带电粒子在电场中定向移动的现象称为电泳（electrophoresis）。电泳技术是利用带电粒子在电场作用下定向移动的特性，对混合物组分进行分离、纯化和测定的一项技术。2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心电泳的分类按分离目的：分析电泳和制备电泳按电场强度：常压电泳和高压电泳按电泳媒介：自由电泳和区带电泳区带电泳（按支持介质）：淀粉凝胶电泳滤纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳按支持介质形式：水平式电泳、垂直电泳按缓冲液pH值：连续pH和不连续pH电泳2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心临床电泳项目临床上以琼脂糖电泳法开展的电泳项目：血清蛋白电泳免疫固定电泳尿蛋白电泳同工酶电泳脑脊液寡克隆电泳本周氏蛋白电泳脂蛋白电泳2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心血清蛋白电泳（SPE）检测蛋白质水平病理改变的方法和手段。主要用于肝病、肾病、自身免疫病、血液病、多发性骨髓瘤等蛋白质紊乱疾病的诊断。电泳图谱不能直接对临床疾病进行确诊，但可通过特征性图谱对某些疾病进行分类，评估疾病的进程和活动状况，评价治疗方案是否有效。2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心血清免疫固定电泳（IFE）是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作，是免疫沉淀反应的一种混合技术。优势：将血清蛋白电泳、高分辩率、抗原-抗体特异性免疫反应等有机结合，对蛋白进行分离和定型，形象地观察Ig的各类重链和轻链分型。2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳结果2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心血清蛋白质的等电点、平均相对分子量、及正常含量清蛋白Aα1α2βγpI相对分子量（×104）含量（%）4.886.957~725.06202~55.06304~95.129~156.2~126.85~7.315.6~3012~20球蛋白球蛋白2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心正常血清蛋白质电泳图谱2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心血清蛋白电泳区带白蛋白区带：主要由白蛋白构成。α1-球蛋白区带：α1-抗胰蛋白酶、α1-脂蛋白、α1-酸性糖蛋白、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等。α2-球蛋白区带：α2-巨球蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、α2-脂蛋白、红细胞生成素等。β-球蛋白区带：主要含铁蛋白、β-脂蛋白、补体C3、C4、β2-微球蛋白等。γ-球蛋白区带含IgG、M、A、D、E免疫球蛋白。2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心正常参考值A：32～50g/L(60.3～71.4%）α1：10～40g/L（1.4～2.9%）α2：6～10g/L（7.2～11.3%）β：6～13g/L（8.1～12.7%）γ：7～15g/L（8.7～16.0%）2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心临床意义1、M蛋白（异常免疫球蛋白）血症：在β-球蛋白区、γ-球蛋白区或两者之间，出现区带细而浓，有时呈波浪状，在光密度计扫描图上呈尖陡高峰的M蛋白带。2、蛋白质缺乏症3、肾病4、急慢性炎症5、肝病：肝硬化出现“β-γ桥”原发性肝癌在Alb与α1-球蛋白之间出现一小的区带，称为甲胎蛋白带。2011春季学期春季学期19/4生物化学与分子生物学实验教学中心异常血清蛋白电泳图谱及临床分析急性炎症及应激型：当机体受到各种损伤或炎症刺激时的病理现象。主要特征：Alb减少或正常，α1、α2-球蛋白增高，γ-球蛋白增高不明显，当炎症转为慢性时，可明显增加。病理生理：Alb下降主要是由于蛋白分解亢进所致,α1和α2-球蛋白增加与急性时相反应蛋白α1糖蛋白增加有关，β区带减少是由于转铁蛋白分解代谢增加所致。新生儿由于结合珠蛋...
