*人源化单克隆抗体为什么要研究人源化单克隆抗体？鼠源性单克隆抗体局限性：1、不能有效地激活人体中补体和Fc受体相关的效应系统。2、被人体免疫系统所识别，产生人抗鼠抗体（humanantigenmouseantibody，HAMA）3、在人体循环系统中很快被清除掉。所以，必须通过人源化改造获得低免疫原性、高效性、人源性单克隆抗体。什么是人源化单克隆抗体？人源化单克隆抗体是利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用的抗体。斯坦利斯（Steinitz）1977年报道了利用EB病毒（一种常见疱疹病毒），在体外直接感染人外周血淋巴细胞，建立了能分泌半抗原抗体的人B淋巴细胞系。后来用这种技术成功获得了抗病毒、细菌、血型抗原、自身抗原及肿瘤相关抗原的人单克隆抗体分泌细胞。人源单克隆抗体的发展制备人源单克隆抗体的方法1、人—鼠杂交瘤单克隆抗体。人-鼠杂交瘤的融合方法基本与鼠-鼠杂交相同。亲本骨髓瘤细胞是小鼠骨髓瘤细胞，亲本B细胞来源于人外周血淋巴细胞、淋巴结细胞、脾细胞。2、人—人杂交瘤单克隆抗体。建立人骨髓瘤或其他人细胞系与人淋巴细胞融合来制备人单克隆抗体。人源性融合亲本细胞须具有较高的融合率、产生的杂交瘤核型稳定并能产生一定量的具有特异性的抗体等特征。3、严重联合免疫缺陷小鼠制备人单克隆抗体。将人免疫干细胞移植到SCID小鼠（CB-17纯系小鼠16号染色体突变，使动物T、B淋巴细胞功能障碍导致联合免疫缺陷）体内，使该小鼠获得人的免疫系统。4、基因工程单克隆抗体——基因工程抗体通过PCR技术获得抗体基因或抗体基因片段，与适当载体重组后引入不同表达系统所产生的抗体。基因工程技术可以获得完全人源化抗体。1.嵌合抗体（Chimericantibody)用人源基因代替鼠源单抗的恒定区，即该单抗由鼠的可变区和人的恒定区组成的嵌合抗体。由于嵌合抗体可变区（V）约占整个抗体的30%，鼠源性抗体V区中的框架区（FR)仍残留一定的免疫原性，可诱导HAMA反应。灵长目源抗体也是一类嵌合抗体，通过免疫短尾猿猴产生。由于其抗体的可变区与人可变区无差异，不至于发生抗体反应。缺点解决方案2.CDR移植抗体（CDRgraftedantibody)真正意义上的抗体人源化。抗体中除了3个互补决定区（CDR）是鼠源的外，其余全部是人源结构，人源化程度可达到95%以上，具有更高的安全性和更低的毒性。不足有时异基因的CDR人源化抗体可能引起抗个体基因型反应。改良方案——进行SDR移植改良近年来,人源化抗体和人抗体的出现为临床应用带来了新的希望,当前正处于临床研究的多种抗体中,嵌合抗体和人源化抗体所占比例大于70%。目前的人源化抗体,主要用于肿瘤、自身免疫性疾病和心血管疾病的治疗以及抗移植排斥反应和抗病毒感染等方面。临床应用1.在肿瘤治疗方面的应用:单抗药物抗肿瘤能有效地降低传统肿瘤药物治疗的不良反应。如2005年我国开发出癌症治疗药——重组人源化抗人表皮生长因子受体单克隆抗体(商品名：泰欣生)。泰欣生联合放疗治疗鼻咽癌的完全缓解率比单纯放疗的患者提高30%以上。2.在器官移植中的应用:近年来,利用抗体药物作为实体器官移植的诱导治疗逐渐增加。如1986年批准进入美国市场的治疗性抗体类药物抗CD3单抗即被用于肾、心脏、肝脏移植排斥的逆转。3.在心血管疾病方面的应用：美国FDA于1994年批准了第一个人-鼠嵌合Fab抗体的上市，该抗体现已被广泛应用于多种心血管疾病治疗,主要用于预防冠状动脉成形术后的再狭窄。4.在自身免疫性疾病方面的应用:现有的研究表明,抗体对类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣、多发性硬化、硬皮病、溃疡性结肠炎等疗效较好。5.在抗病毒感染方面的应用：近年来研究表明,在HBV、HCV、HIV等病毒感染性疾病中,人源化抗体显示了较好的应用前景。如：商品名为SynagisTM的抗呼吸道病毒感染的抗体在美国已经上市,为人源化的基因工程抗体。*谢谢观看！
