下载后可任意编辑轻工业微生物实验指导书1下载后可任意编辑实验一 培育基的制备与灭菌技术一、 试验原理马铃薯中含有淀粉、 蛋白质、 脂类及多种维生素经煮沸后可把这些营养成分从中溶出以供酵母和霉菌生长需要, 加入葡萄糖或蔗糖以补充微生物所需的碳源。此培育基为半合成培育基。二、 实验目的: 1、 掌握培育基的制备方法, 2、 学会高压蒸汽灭菌技术。三、 实验材料和仪器: 1、 马铃薯、 葡萄糖( 或蔗糖) 、 琼脂。2、 烧杯、 漏斗、 试管、 三角瓶、 量筒、 玻璃棒、 纱布、 棉花、 细绳、 牛皮纸、 试管架、 培育皿。3、 手提式高压蒸汽灭菌锅、 天平、 电炉。四、 实验方法与步骤: ( 1) 选无芽、 无腐烂的马铃薯、 洗净、 削皮、 称 40g 切碎加水 200ml,放入 1000ml 烧杯中煮沸 0.5hr、 冷却用纱布过滤去渣。( 2) 在清液中加入 4g 葡萄糖溶解补水至 200ml, 此时到入一试管 10ml。余下溶液加 3.8g 琼脂加热熔化。( 3) 试管分装: 取玻璃漏斗装在漏斗架上, 漏斗下连一橡胶管, 与玻璃管嘴相接, 橡皮管上夹一弹簧夹, 培育基倒入漏斗, 经过弹簧夹控制培育基的流量。( 4) 余下的培育基分装在两个 250ml 的三角瓶中。( 5) 高压蒸汽灭菌: 把溶解完的培育基用棉塞塞上并用牛皮纸把棉花包住, 在 121℃, 0.1Mpa 下灭菌 20min 即可, 灭菌时要注意放净阀气。取出灭菌物品时一定要等到压力降到零时打开灭菌锅盖。( 6) 斜面摆放: 将分装灭菌后的琼脂培育基试管置于水平放置的试管上, 凝固后即成斜面。( 7) 培育皿培育基的倾倒: 先用酒精棉球擦拭桌面及双手,在靠近酒精灯火焰的上方把冷却到 45℃左右的培育基倒入培育皿内, 每只倒入 15ml 左右。注意: 温度太低培育基会凝固。五、 思考题: 2下载后可任意编辑1．培育基配制好后为什么要灭菌? 2．蒸汽灭菌应注意几个问题? 为什么? 实验二 微生物接种和无菌操作技术一、 实验目的1、 了解无菌操作在微生物接种过程中的重要性, 掌握无菌操作的基本环节。2、 掌握几种常见微生物的接种方法, 为微生物的形态观察作准备。二、 实验材料1、 菌种 ( 1) 细菌 大肠杆菌( Escherichia coli) , 枯草芽孢 杆 菌 ( Bacillus subtilis) ,(2) 酵 母 酿 酒 酵 母 ( Saccharomyces cerevisiae) ,(3)霉菌 黑曲霉( Aspergillus niger) 2、 培育基( 1) 肉汤培育基 固体斜面培育基, 液体培...
