细菌形态学检查法重点提示•不染色标本的形态学检查•染色标本的形态学检查–革兰染色–抗酸染色一、显微镜1.普通光学显微镜(lightmicroscope)–光源:可见光2.暗视野显微镜(darkfieldmicroscope)–暗背景,菌体发光–用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察3.荧光显微镜(fluorescencemicroscope)–光源:100W~200W的高压汞灯一、显微镜4.相差显微镜(phasecontrastmicroscope)–检查不染色活细菌的形态及某些内部结构5.电子显微镜(electronmicroscope)–光源:电子流–透射电镜:观察细菌内部超微结构–扫描电镜:对细菌表面结构及附件观察二、不染色标本的细菌学检查•常用方法–压滴法–悬滴法•用途–动力试验:检查细菌有无动力及运动状况–制动试验:初步鉴别病原菌;鉴定血清型三、细菌染色标本的检查(一)常用染料1.碱性染料:解离后色基带正电荷,如美蓝、结晶紫、碱性复红等。2.酸性染料:解离后色基带负电荷,如伊红、酸性复红、刚果红等。3.中性染料:碱性染料与酸性染料的复合物,如瑞氏染料、姬姆萨染料等。三、细菌染色标本的检查(二)常用染色方法•单染色法–只用一种染料,如吕氏美蓝。用于观察细菌的形态、大小、排列。•复染色法(鉴别染色法)–用两种或两种以上不同颜色的染料,以区别细菌的着色性。三、细菌染色标本的检查1.革兰染色(Gramstaining)(1)原理–细胞壁学说:两种细菌细胞壁结构不同-G+菌肽聚糖层厚、致密,脂质含量少;G-菌薄而疏松,脂质含量多。–等电点学说:G+菌pI2~3;G-菌pI4~5–化学学说:G+菌含有核糖核酸镁盐多,G-菌含量少。三、细菌染色标本的检查-革兰染色(2)结果–细菌分为革兰阳性(G+)菌和革兰阴性(G-)菌紫色为革兰阳性菌,红色为革兰阴性菌革兰染色方法三、细菌染色标本的检查2.抗酸染色(1)原理:分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到初步鉴别细菌的目的。(2)结果:抗酸性细菌和非抗酸性细菌•未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌•脱色经复染呈蓝色为非抗酸性细菌3.其他染色方法(1)鞭毛染色(2)荚膜染色