大花惠兰、石斛兰的组织培养 （ 1） 材 料 与 方 法 材 料 ： 大花蕙 兰大花品 种 嫩 芽
将 母 株 放 在 温 室 内 盆 栽 培 养 ,于 2～ 5 月陆 续 从 母 株 上 取 8 cm 左 右 的 新 芽 ,剥 去 最 外 几 层 叶 片 ,去 芽 的 上 半 段 ， 然 后在 超 净 工 作 台 上 采 用 三 步 灭 菌 处 理 法 处 理 :先 在 70 %的 酒 精 中 处 理 6 s ,立 即投 入 10 %的 次 氯 酸 钠 溶 液 中 10 min ,稍 加 摇 动 ,取 出 后 用 无 菌 水 冲 洗 ,剥 去外 层 2～ 3 枚 叶 片 ;再 放 入 5 %的 次 氯 酸 钠 溶 液 中 5 min ,取 出 后 无 菌 水 冲 洗 ,剥 至 最 后 1 枚 叶 片 ;再 放 入 1 %的 次 氯 酸 钠 溶 液 中 1 min ,取 出 后 无 菌 水 冲 洗数 次
以 上 次 氯 酸 钠 溶 液 中 均 加 入 Tween20 以 利 杀 菌 剂 更 有 效 地 发 挥 作 用 ,在 无 菌 条 件 下 剥 出 约 5 mm长 地 茎 尖 ,以 生 长 点 为 中 心 ,用 解 剖 刀 把 茎 尖 切 成 4 个 小 方 块 ,分 别 接 入 已 经 准 备 好 的 培 养 基 上
培 养 基 ： 原 球 茎 诱 导 培 养 基 配 方 : MS + 0
5 mg/ L BA +1
0 mg/ L KT + 2 g/ L 活 性 炭 （ active carbon， AC）
原 球 茎 增 殖 培 养 基 配 方 为 :MS + 0
5 mg/ L BA + 0
8 mg/ L2 ,42D +2 g/ L AC,
幼 苗 分 化 及 生 根 养 基 配 方 为 :MS + KT 1 mg/ L + NAA 0
