下载后可任意编辑甘油的检测方法汇总12024 年 4 月 19 日下载后可任意编辑甘油的检测方法汇总在发酵行业中,甘油作为底物,是发酵液中生物合成的直接前体,会影响外源蛋白的启动表示效率,其含量的高低直接影响产物的发酵单位,是决定菌种取舍的重要指标,是提高工程菌的发酵密度,提高产品生产率的关键。在生物柴油生产中,它是副产物,其含量直接影响生物柴油的使用性能,是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。另外,甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤,能延长红细胞的保存期,被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。由于甘油用途很广,因此其含量的测定具有非常重要的意义。当前国内外甘油含量的测定方法较多,主要有高碘酸氧化法、Cu2 + 络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。下面将对其进行简要概述:12024 年 4 月 19 日下载后可任意编辑一、高碘酸法1.原理:高碘酸氧化法是当前常见用于甘油含量检测的方法,利用高碘酸与甘油发生氧化还原反应,剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反应生成碘,再用硫代硫酸钠进行滴定,根据消耗的硫代硫酸钠的量来计算甘油的含量。2.操作步骤准确发酵液 10ml 于 100mL 小烧杯中,加少量水溶解,然后转移至 100mL 容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀,静置。用移液管准确移取 10mL 上述溶液于碘量瓶中,加入 20mL 高碘酸钠溶液,混合均匀后,于黑暗中避光静置40min,然后加入碘化钾溶液和 20%盐酸溶液各 15mL,调节 pH 值在 0.8~1.0 之间,然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定,近终点时,加入 2mL 淀粉指示剂溶液,继续滴定至溶液蓝色消逝。同时做试样空白。3.计算:22024 年 4 月 19 日下载后可任意编辑式中:w——样品中甘油的含量,%;V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,mL;V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,mL;C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L;M——甘油相对分子质量;二、酶比色法1.原理:它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法,是指甘油在甘油激酶作用下转化为 3-磷酸甘油,后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢,然后过氧化氢和 4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在 500 nm 左右有特征吸收峰的醌亚胺,经过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的 H2O2,甘油的含量与生成的H2O2成正比,这样用比色法...