峰高法和峰面积法的选择 在色谱定量分析中，选用峰高法还是选用峰面积法，主要决定在检测器的线性范围内，峰高和峰面积测量的准确性和重复性。除了归一化法最好用峰面积法外，其他三种定量方法中峰高和峰面积都可用作精确的定量方法。 在检测器的线性范围内，峰高和峰面积测量的准确性受色谱分离度的影响，要准确地测量峰高和峰面积，色谱分离应达到一定的分离度才行。图 2-3-18 至图 2-3-22给出了峰高比 1:1至 16:1 时的标准分离度曲线，每张图上的黑点表示了每个峰峰尖的真实位置，此黑点与图中所示的峰尖的垂直位移就是测量误差。峰高比越大，要求能准确测量峰高的分离度也越大。峰高比为1/1和2/1时，峰高能得到准确测量的最低分离度为0.8；峰高比为4/1 时，峰高能得到准确测量的最低分离度为 1.0；峰高比 16/1 时，峰高能得到准确测量的最低分离度为 1.25。关于分离度对峰高测定准确度的影响大致可认为：当分离度 Rs-1.0 时，相对峰高从 128:1 变化到 1:128时，峰高的测量误差小于+-3%。 分离度对峰面积测量的影响较峰高要大，即2-3-23 给出了分离度Rs=1.0 和不同峰高比时，面积较小峰的峰面积测量值为其真实面积的百分数。由图可见，当峰高比大时，面积较小峰的峰面积测量准确度降低，此时测量较大峰的峰面积较准确，误差不超过 1%。小峰峰面积测量误差都是负值，而大峰峰面积测量误差都是正值。 如果两个重叠峰峰高比为x（x>1），则两个峰峰面积测量误差关系为： 表2-3-12 不同h1/h2时测量小峰峰面积的相对误差(http://www.chemalink.net/books/C/412/0.html) 表2-3-13 色谱分离参数对浓度型检测器峰高和峰面积定量分析精度的影响(http://www.chemalink.net/books/C/413/0.html) 由表2-3-13 数据可看出：当流动相（GC的载气，HPLC的洗脱液）流速可以准确控制，而影响容量因子（k'）的一些因素（如GC的柱温、HPLC的流动相的组成）不能保持恒定（如使用 GC的程序升温，HPLC的梯度洗脱）时，用峰面积定量较好；而当容量因子（k'）和柱效（n）保持不变，流动相流速不稳定，有微小变化时，峰高受到的影响要小于峰面积，此时用峰高定量能得到较为精确的定量结果。当柱效（n）有所变化时，使用峰面积定量可得到较精确的结果。 总之，在分离度较好，色谱峰形较好，峰面积可以准确测量时，以用峰面积法定量为好。特别是在气相色谱使用程序升温和液相色谱使用多元梯度洗脱时，最好使用峰面积法定量。但当分离度不好，色...
